桃砧木GF677叶片离体再生和愈伤组织诱导保存

作     者：李果果 

作者单位：华中农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李国怀

授予年度：2011年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：桃砧木GF677 叶片 植株再生 愈伤组织 

摘      要：本试验以桃砧木GF677（Prunus. amygdalus×Prunus.persica）为材料,首先通过茎段培养获得组培无菌苗,其次通过对基本培养基类型、激素种类和浓度配比、碳源和暗培养时间等一系列因素的研究,初步建立了桃砧木GF677叶片离体再生和愈伤组织诱导、保存体系。主要研究结果如下： 1、6月下旬进行GF677茎段培养,腋芽萌发率可达90.90%,且生长状况良好。GF677试管苗适宜的增殖培养基为LP基本培养基+6-BA 0.75 mg/L+IBA 0.3 mg/L+GA3 0.5 mg/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.8 g/L,每28 d左右继代一次。 2、GF677试管苗适宜的生根诱导培养基为MS基本培养基+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+PG 120.0 mg/L,添加蔗糖20.0g/L,琼脂6.8 g/L。培养30 d生根率可达100%,平均每棵植株生根10.72条,平均根长3.72 cm。 3、GF677叶片再生适宜的培养基配方为LP基本培养基+6-BA4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+AgNO3 0.5 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。叶片沿垂直主脉方向横切三刀,近轴端接触再生培养基,暗培养21d后转移至光培养,再生率达13.33%。 4、采用预处理的方式获得的GF677预培养叶片较佳的再生培养基配方为SH基本培养基+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+AgNO3 0.5 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。暗培养21 d后转移至光培养,再生率为9.93%。 5、以GF677试管苗叶片为外植体,愈伤组织诱导较佳的培养基配方为LP基本培养基+TDZ 1.0 mg/L+6-BA 0.6 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+AgNO3 0.5 mg/L,添加山梨醇20.0g/L,琼脂6.0g/L。选取继代时间为28 d左右的试管苗幼嫩叶片,暗培养21d后转移至光培养。 6、GF677愈伤组织保存的较佳的培养基配方为LP基本培养基+6-BA 0.5 mg/L+ 2,4-D 0.5 mg/L+CH 0.2 g/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.0 g/L。选取继代时间为21 d左右的愈伤组织暗培养保存。