Mibefradil对db/db鼠的降糖作用及其机制初步研究

作     者：路玉洁 

作者单位：第三军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐梓辉

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：糖尿病 Mibefradil db/db鼠 血糖 

摘      要：研究背景: 糖尿病（diabetes mellitus，DM）是一组因长期慢性高血糖导致机体外周组织胰岛素敏感性降低，伴或不伴胰岛β细胞合成胰岛素能力缺陷的内分泌性疾病。现有许多研究证实糖尿病患者存在细胞内钙离子调节紊乱，新近研究表明，胰岛β细胞属电兴奋性细胞，β细胞膜ATP依赖的钙通道及钾通道是影响胰岛素分泌的重要离子通道，在人类和啮齿类动物中钙离子通道影响葡萄糖诱导胰岛素分泌水平。钙离子通道阻滞剂是一种通过阻断细胞膜钙离子通道，抑制胞外的钙离子内流，使胞内钙离子水平降低，继而调节靶器官功能的药物。目前，已有少数关于L型钙离子通道阻滞剂对糖尿病影响的报道，但尚未有将T型钙离子通道阻滞剂应用于糖尿病模型，对其降糖作用的研究报道。本研究拟利用T型钙离子通道阻滞剂Mibefardil、NNC55-0396以及L型钙离子通道阻滞剂nicardipine分别干预db/db鼠，观察对比其降糖效果，并深入了解Mibefardil对糖代谢相关指标及T型钙离子通道特异性亚基Cav3.1及Cav3.2的表达，并对其作用机制进行初步探讨。 方法: 取8W鼠龄雄性野生型小鼠及db/db鼠各24只，分别按随机法分为4组（共8组）：野生安慰剂组、野生Mibefradil干预组、野生NNC干预组、野生nicardipine干预组、db/db安慰剂组、db/db Mibefradil干预组、db/db NNC干预组及db/db nicardipine干预组（n=6）。Mibefradil与NNC组予30mg/(kg d)剂量，nicardipine组予25mg/(kg d)剂量，安慰剂组予等体积生理盐水，均腹腔注射，分早晚两次给药，干预1周;比较实验动物药物干预前后血糖、体质量、平均血压、心率及ITT的变化。重点观察Mibefradil干预后胰岛素、糖化血红蛋白及总胆固醇的变化水平，并用免疫组织化学法及Western-Blot检测T型钙通道特异性亚基Cav3.1及Cav3.2表达水平。 结果: （1）与db/db安慰剂组相比，药物干预后，db/db Mibefradil组及db/db NNC干预组空腹血糖水平显著下降（P0.05）;而野生安慰剂组和野生药物干预各组之间均无明显差异（均P0.05）;（2）与db/db安慰剂组相比，药物干预后，db/db Mibefradil组及db/db NNC干预组均体质量明显下降（P0.05）;而野生安慰剂组和野生药物干预各组之间均无明显差异（均P0.05）;（3）与db/db安慰剂组比较，药物干预后，db/db Mibefradil组24h摄食量、基础胰岛素、糖化血红蛋白、胆固醇水平均明显下降（均P0.05）;（4）db/db鼠在肝脏及脑组织中发现Cav3.1及Cav3.2较野生安慰剂组蛋白高表达（均P0.05）。 结论: Mibefradil具有降低2型糖尿病高血糖的作用，其降血糖作用不同于传统糖代谢途径，是通过调节电压依赖性的钙通道发挥作用的。