检测BDV抗原的双抗体夹心ELISA法的建立与临床应用

作     者：黄艺婧 

作者单位：遵义医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：徐平

授予年度：2013年

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

主      题：博尔纳病病毒 双抗体夹心ELISA法 抗原 病毒性脑炎 

摘      要：目的：建立一种简单、快速检测博尔纳病病毒(BDV)的双抗体夹心ELISA法,并探索其应用于临床的可行性。 方法：首先根据双抗体夹心ELISA法,分别对BDV p24小鼠单克隆抗体、BDV p24兔多克隆抗体和酶标抗体作多梯度稀释,以确定最佳实验条件,然后对该方法的精密度、灵敏度、稳定性与特异性进行初步评价。并采用己建立的双抗体夹心ELISA法检测44例临床确诊为病毒性脑炎(VE)的患者脑脊液(CSF),以及44例神经系统非炎性疾病患者脑脊液样本中是否存在BDV抗原。采用统计学软件对得到的实验结果进行统计学意义分析。 结果：BDV p24小鼠单克隆抗体的最佳稀释度为1：160,BDV p24兔多克隆抗体的最佳稀释度为1：2500,酶标抗体的最佳稀释度为1：5000,该法的检测灵敏度为170ng/ml,精密度批内变异0.05),无统计学意义。 结论：成功建立检测BDV抗原的双抗体夹心ELISA法,同时为临床检测BDV抗原奠定基础。