尼可地尔对大鼠心肌缺血再灌注解剖无复流的实验研究

作     者：张文卉 

作者单位：昆明医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孟照辉;田军

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：尼可地尔 无复流 心肌缺血再灌注 

摘      要：研究目的：建立心肌缺血再灌注模型,观察尼可地尔对大鼠急性心肌缺血再灌注后无复流范围及心肌梗死范围的影响,评估药物对心肌损伤及纤维化程度的影响,并比较其与腺苷治疗作用的异同性。 研究内容与方法：雄性SD大鼠48只,随机分为急性损伤组和慢性损伤组,每组分假手术组、模型组、腺苷组和尼可地尔组。急性实验：模型组、腺苷组和尼可地尔组采用开胸冠状动脉结扎方法,使冠状动脉缺血45分钟再灌注120分钟建立急性心肌缺血再灌注无复流模型。假手术组只穿线不结扎,再灌注120分钟后处死动物。再灌注30分钟后,检测血清心肌酶水平。造模后,分别用硫黄素S (Thioflavine S)、伊文斯蓝(Evan s blue)、氯化三苯基四氮唑(Tfiphenyltetra zolium chloride, TTC)染色评估大鼠心肌解剖无无复流范围及梗死范围。慢性实验：模型组、腺苷组和尼可地尔组采用开胸冠状动脉结扎方法,使冠状动脉缺血45分钟持续再灌注建立心肌缺血再灌注无复流模型,假手术组只穿线不结扎。术后28天采用超声心动图评价存活大鼠心脏功能。随后处死大鼠,留取心脏标本进行病理染色,用苦味酸天狼猩红染色分析左室梗死区游离壁厚度(假手术组为左室游离壁厚度,left ventricular free wall thickness, LVWT)、室间隔厚度(septum thickness, SPT)、室间隔与左室游离壁厚度比值(SPT/LVWT)、室间隔的心肌横断面积(myocardial across area of septum, MAAS)、梗死区(假手术组为左室游离壁)及非梗死区的胶原容积分数(collagenvolume fraction, CVF)。 结果：急性试验：缺血45分钟再灌注120分钟后,模型组、腺苷组和尼可地尔组间的缺血面积(ARR/LV)差异无统计学意义(P0.05)。与模型组相比,腺苷组和尼可地尔组的心肌梗死面积(NA/AAR)及无复流面积(ANR/AAR)显著减小(P0.01),差异有显著性,说明尼可地尔和腺苷可减小心肌梗死面积,改善心肌梗死后冠脉灌注量,提高心肌再灌注后心肌复流的比例。再灌注30分钟后,检测血清心肌酶结果显示,尼可地尔组与腺苷组的心肌酶水平与模型组比较显著降低,差异有统计学意义(P0.01),且尼可地尔在降低血清CK与CK-MB中对比腺苷组效果更优,差异有统计学意义(P0.01)。说明尼可地尔可以改善心肌损伤程度,其效果优于腺苷。慢性试验：缺血再灌注28天,评估心脏结构和功能示：心脏超声提示尼可地尔组与模型组相比在射血分数(ejection fraction, EF)明显升高(P0.05),差异有显著性,左室舒张末期容积(end-diastolic volume, EDV)明显降低(P0.01),差异有显著性。表明尼可地尔可以提高心脏左室射血分数,降低左室舒张末期容积。同时,28天后处死大鼠后,模型组心肌梗死区域发生了明显的心肌纤维化,表现为成纤维细胞增生和胶原沉积,模型组心肌细胞排列紊乱,纤维增生,提示心室重构明显。与模型组相比,腺苷组和尼可地尔组的纤维化程度显著降低,CVF%显著低于模型组(P0.01),有统计学差异。说明腺苷和尼可地尔均能在心肌梗死的病理后期降低心肌纤维化的程度,改善心室重构。 结论：本研究得出尼可地尔对于心肌缺血再灌注后的SD大鼠,可以降低其再灌注后无复流梗死面积,改善心肌梗死后冠脉灌注量,减轻心肌损伤程度,提高心脏左室射血分数,降低左室舒张末期容积,并能在心肌梗死的病理后期降低心肌纤维化的程度,改善心室重构,其作用机制以及疗效与腺苷相似。 本论文的创新性体现： 1.将尼可地尔和腺苷在治疗急性心肌缺血再灌注损伤中近期／远期作用进行比较,探寻尼可地尔在治疗缺血再灌注损伤中的优势,为临床合理应用尼可地尔提供实验数据。 2.尼可地尔在心肌缺血再灌注损伤中可以有效改善心室功能,保护心肌细胞,减少心肌损伤,其效果可能优于腺苷治疗。