枣的幼胚培养

作     者：张存智 

作者单位：甘肃农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王发林

授予年度：2007年

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

主      题：枣 幼胚培养 胚胎发育 

摘      要：本实验以陇东马牙枣幼嫩果实为试材,选取3个不同生长发育期的枣幼果,针对不同时期胚生长发育特点,对其进行离体培养,筛选出适宜枣幼胚培养的培养基、培养条件以及体细胞胚胎的诱导,为克服枣胚败育问题,缩短育种周期提供技术依据。同时对四个品种枣胚的形成与发育过程进行了组织胚胎学研究,为枣的幼胚培养的取材时间,研究杂种胚的败育机理,寻找导致胚败育的原因及克服办法,提供理论参考和实验依据。主要研究结果如下: 1、实验结果表明,胚龄是影响胚培养的关键因素。枣胚接种后,主要有三种生长途径:即胚性生长、形成愈伤组织、直接萌发成苗,且胚龄越小越易诱导愈伤组织。盛花后45d和55d的幼胚不易直接成苗,低温(2-4℃)处理30d有利于盛花后65d的枣胚直接萌发成苗。 2、枣的幼胚培养,胚龄较小的胚(盛花后45d、55d)采用三步培养法。第一步先将去皮种子接种在胚萌动培养基上;第二步当胚萌发后从胚乳中或愈伤组织中剥离转至MS无激素的培养基上培养30d后转接至诱导愈伤组织培养基上诱导愈伤组织;第三步由愈伤组织诱导胚状体成苗或经诱芽、生根成苗。结果表明,幼胚萌动培养基宜选用MS-H+ZT0.5mg/L+IAA0.6mg/L+蔗糖50g/L+LH0.5g/L+琼脂4.0g/L+PVP0.2 g/L;诱导愈伤组织适宜的培养基为Nitsch的基本培养基上,附加BA 1.0 mg/L +2,4-D1.5 mg/L+蔗糖30g/L +琼脂4.0g/L。诱导胚状体培养基宜选用,MS+BA1.0 mg/L+ IBA0.2 mg/L +LH0.5mg/L+Vc0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L;愈伤组织转接在MS+ BA1.0mg/L+ IAA0.5mg/L+LH0.5mg/L+Vc0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L可再生出丛生芽。 3、在2-4℃低温处理30d有利于盛花后65d的枣胚直接萌发成苗,较适宜的培养基为Nitsch+1.5mg/LZT+0.6mg/LIAA+LH0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L。 4、生根培养基1/2MS+IBA1.0mg/L+Vc0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂4.0 g/L的生根效果较好。 5、在胚培养过程中诱导出胚状体,并通过胚状体得到12株苗。