黄精皂苷对慢性应激抑郁大鼠5-HT1AR介导的cAMP-PKA-CREB信号通路的影响及其可能机制

作     者：魏浩洁 

作者单位：安徽医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐维平;魏伟

授予年度：2012年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：黄精皂苷 抑郁症 行为学 5-HT1AR 信号转导 

摘      要：目的： 1.通过对慢性应激抑郁大鼠行为学的观察，进一步明确SRP的抗抑郁作用及其特点。 2.通过对慢性应应激抑郁大鼠海马、大脑皮层5-羟色胺1A受体(5-hydroxy tryptamine1A receptor,5-HT1AR)、环磷酸腺苷(Cyclic Adenosine monophosphate, Camp)、蛋白激酶A(proteinkinase A, PKA)及cAMP反应原件结合蛋白(cAMP-response elementbinding protein, CREB)表达的研究，探讨黄精皂苷的抗抑郁作用及其可能机制。 方法： SD大鼠60只，随机分为6组：正常组、模型组、SRP (100、200、400mg/kg)组和氟西汀(2mg/kg)组。从建立模型第1天开始，连续给药21天，正常组、模型组每天灌服等体积的羧甲基纤维素钠溶液，其他各组分别按照已设置剂量灌服SRP。 分别称取各组大鼠在实验第1天和第21天的体重，实验第21天体重减去实验第1天体重为各组大鼠的体重增长值;通过大鼠自主活动程序仪、测定大鼠糖水摄入量观察大鼠行为学的变化观察大鼠行为学指标变化;采用放射免疫法测定大鼠海马和大脑皮层cAMP含量;采用免疫组化法测定大鼠海马和大脑皮层5-HT1AR、PKA、CREB蛋白表达水平。 结果： 1. SRP对慢性应激抑郁大鼠体重的影响实验的第1天，各组大鼠体重差异无显著性;实验第21天，与正常组大鼠比较，模型组大鼠体重增长值显著减少;与模型组大鼠比较，SRP(100，200，400mg·kg-1)组大鼠体重增长值均有增加，且差异具有统计学意义。 2. SRP对慢性应激抑郁大鼠行为学的影响 (1)实验第1天，各组大鼠自主活动次数差异无显著性;实验第21天，与正常组比较，模型组，SRP (100、200mg/kg)组大鼠自主活动次数明显减少，且差异有显著性;与模型组比较，SRP(200、400mg/kg)组，氟西汀组大鼠自主活动次数明显增加，差异有显著性。 (2)实验第1天，各组大鼠悬尾不动时间差异无显著性;实验第21天，与正常组比较，模型组大鼠悬尾不动时间增长;与模型组比较，SRP(100，200，400mg·kg) 组大鼠悬尾不动时间缩短，差异有显著性。(3)实验第1、7天，各组大鼠的糖水摄入量差异无显著性，实验第14、21天，与正常组比较，模型组、SRP100mg/kg组大鼠糖水摄入量减少，差异有显著性;与模型组比较，SRP (200、400mg/kg)组大鼠糖水摄入量均增多，差异有显著性。 3. SRP对慢性应激抑郁大鼠海马区及大脑皮层5-HT1AR表达的影响与正常对照组比较，模型组及SRP100mg/kg组5-HT1AR平均光密度显著减少，差异有显著性，与模型组比较，SRP (200、400mg/kg)组及氟西汀组大鼠海马及大脑皮层平均光密度显著增加，差异有显著性。 4. SRP对慢性应激抑郁大鼠海马区及大脑皮层cAMP含量的影响与正常组比较，模型组、SRP100mg/kg组cAMP含量显著减少，差异有显著性，与模型组比较，SRP (200、400mg/kg)组、氟西汀组大鼠海马及大脑皮层cAMP含量显著升高，差异有显著性。 5. SRP对慢性应激抑郁大鼠海马区及大脑皮层PKA、CREB表达的影响与正常对照组比较，模型组及SRP100mg/kg组显著减少，且差异有显著性，与模型组比较，SRP(200、400mg/kg)组及氟西汀组大鼠海马及大脑皮层PKA、CREB表达显著增加，差异有显著性。 大脑皮层各断面均可见到5-HT1AR、PKA、CREB染色阳性细胞，5-HT1AR多见于皮质Ⅲ-Ⅴ层，PKA、CREB多见于皮质Ⅱ-Ⅵ层，染色反应较为明显，阳性颗粒位于突起及胞质内。且主要集中于海马CA1、CA3区锥体细胞和齿状回颗粒细胞。 结论: 1. SRP可以改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁行为表现，如自主活动次数减少、悬尾不动时间延长、糖水摄入量减少等，表明SRP具有改善抑郁症状的作用。 2. SRP通过调节5-HT1AR-cAMP-PKA-CREB信号通路发挥抗抑郁作用，提示5-HT1AR介导的信号通路异常变化是抑郁发生的重要机理，SRP可上调5-HT1AR介导的信号通路可能是其发挥抗抑郁作用主要机理。