拮抗细菌SU8抑菌活性与抑菌物质提取及其理化性质初步研究

作     者：章茂林 

作者单位：湖南农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：廖晓兰;胡昌弟

授予年度：2014年

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

主      题：假单胞菌SU8 抑菌物质活性 提取方法 理化性质 

摘      要：植物在生长的过程中,常常受到各种因素的影响,如：光照、温度、湿度、pH、肥料、病原物等,其中病原物是影响植物能否增产的重要因素。水稻是重要的粮食作物,但在其生长期间常受水稻纹枯病、稻瘟病、稻曲病、稻胡麻斑病以及飞虱、螟虫等有害生物的影响。生产上,为了控制病虫害的干扰常常施用化学药剂控制病虫害的发展和蔓延。多年的实践结果表明：长期大量使用化学药剂,不仅污染环境,而且容易导致病虫产生抗药性。研究结果表明：采用生物防治不仅能解决污染问题,而且能提高防治效果。利用拮抗菌控制有害生物成为近年来研究的热点,获得大量的研究成果,其中芽孢杆菌、假单胞菌、链霉菌等拮抗菌已被广泛开发,但应用技术还不成熟,有些菌株容易退化,有些菌株防效不稳定,因此,继续探索高效、低毒、稳定的拮抗菌迫在眉睫。本研究从稻鸭生态系统中筛选出一株拮抗细菌SU8,经形态学观察、生理生化测定、分子检测等技术将其鉴定为铜绿假单胞菌(Gen Bank:HQ283487),为了进一步评价拮抗假单胞菌SU8的生防潜力,开发绿色农药。本研究采用平板对峙法和抑菌圈法研究了拮抗假单胞菌SU8发酵滤液及其乙酸乙酯提取物的抑菌活性,利用离体生测法测定了假单胞菌SU8对水稻纹枯病病菌抑菌活性,研究了其最佳提取溶剂、时间、温度、物料比及其部分理化性质。主要研究结果如下：1.假单胞菌SU8及其发酵滤液对植物病原菌的抑制作用。假单胞菌SU8对稻瘟病菌的抑制效果最好,抑菌带宽度达4.53 cm,辣椒炭疽病菌次之,其余从强到弱依次为烟草赤星病菌,水稻纹枯病菌和小麦赤霉病菌;发酵滤液对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌、小麦赤霉病菌、辣椒炭疽病菌、烟草赤星病菌抑菌活性较弱;乙酸乙酯提取物对烟草赤星病菌的抑制效果最好,抑菌带宽度为3.92cm,对纹枯病的抑菌带宽度为2.34 cm,对其他植物病原菌的抑菌效果从大到小依次为稻瘟病菌、辣椒炭疽病菌和小麦赤霉病菌。这说明拮抗假单胞菌SU8具有可开发仿生农药的前景。2.假单胞菌SU8发酵滤液中抑菌物质的提取及理化性质。乙酸乙酯的提取效果最好,抑菌带宽度达20.05mm,二氯甲烷次之,抑菌带宽度为6.93mm,石油醚的提取效果最差;浸提时间以8h为最佳,抑菌带宽度为20.01mm,其余处理抑菌带宽度从宽到窄依次为4、2、32、16h;提取温度从好到差依次为45℃25℃60℃4℃80℃;最佳物料比为2：1,其抑菌带宽度为15.34mm,其他比例效果均较差。该菌的抑菌物质具有热稳定性,对紫外线不敏感,耐储藏,但耐酸能力较强,耐碱能力差;紫外可见全波段扫描发现抑菌物质为吩嗪类物质。这说明拮抗假单胞菌SU8具有可开发仿生农药的前景。