毛细管电动色谱—电致化学发光分析肌氨酸的研究

作     者：冯淑惠 

作者单位：福州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：林旭聪

授予年度：2014年

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 10[医学] 

主      题：肌氨酸 电动微分离 毛细管电泳 毛细管电色谱 电致化学发光检测 

摘      要：毛细管电动微分离技术分析快速、试剂和样品需要量少、分离效率高,电致化学发光利用电极表面氧化还原反应而产生化学发光,灵敏度高、选择性好,两者的联用在微量物质高效分析的前沿技术研究中得到了重视。肌氨酸作为前列腺癌的诊断中特征指示物质,建立其高效分析技术具有重要意义。本论文从电泳和电色谱技术着手,研究建立了微量肌氨酸的快速、高效的毛细管电动微分离技术,实现了微量肌氨酸的高效分析,拓展肌氨酸的分析途径。本文主要包括以下三个部分：第一章,绪论。阐述了肌氨酸的性质、作用以及其检测方法的研究进展,总结提出本论文选题依据和研究内容。第二章,研究建立了毛细管电泳-电致化学发光检测肌氨酸的技术。探索了毛细管-电极距离,缓冲液等条件对三乙胺发光的影响以及作用机制,在此基础上,进一步研究了肌氨酸、脯氨酸以及羟脯氨酸的分离检测;探索确定了流动相组成、分离电压和进样时间等因素对分离的影响和作用机制,在最佳条件下,脯氨酸、羟脯氨酸和肌氨酸得到了良好的分离,肌氨酸的线性范围为1.0×10-6～1.0×10-5 mol/L,检测限为5.0×10-7mol/L, ECL峰高测定RSD为1.5～4.9%,迁移时间RSD为0.6～2.4%;应用于尿样分析,肌氨酸浓度水平为10×10-6mol/L、5.0×10-5 mol/L、1.0×10-5mol/L时测定回收率为96.11～99.75%,峰高RSD小于5.0%,保留时间RSD小于4.0%,回收率RSD小于6.0%,稳定性和重现性好。第三章,开展了毛细管电色谱(CEC)-电致化学发光(ECL)检测肌氨酸的技术研究。详细研究了不同类型毛细管柱在ECL系统的发光及电色谱行为,研究了在不同毛细管柱情况下分离柱-电极距离,缓冲液以及发光池中pH等条件对肌氨酸发光的影响和作用机制。基于毛细管氰基键合开管分离柱,研究了肌氨酸的CEC-ECL联用技术,进一步考察了多种氨基酸存在下的电致化学发光参数、流动相组成、分离电压及进样时间等对检测的影响。在最优条件下,以25 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 8.5,含50%乙腈)为流动相,脯氨酸、羟脯氨酸和肌氨酸能够产生良好的ECL,并得到了良好的分离,特征指示物肌氨酸的线性范围为1.0×10-5～5.0×10-4mol/L,检测限3.0×10-6mol/L,展开了CEC技术在肌氨酸分析的应用探索。