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CysLT1基因敲除小鼠模型和H99-GFP菌株的制备以及CysLT1受体在小鼠脑微血管和海马中的分布

作     者:陈清汾 

作者单位:福建医科大学 

学位级别:硕士

导师姓名:朱龙坤

授予年度:2014年

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题:CysLT1基因 基因敲除 新生隐球菌 脑微血管内皮细胞 

摘      要:目的: 1、制备CysLT1基因敲除小鼠模型及H99-GFP菌株;2、研究小鼠感染隐球菌H99后CysLT1受体在脑微血管及海马中的表达。 方法: 1、采用PCR,RT-PCR及Western-blot检测鉴定CysLT1基因敲除小鼠;2、基因枪轰击技术制备H99-GFP隐球菌菌株;3、采用小鼠气管接种新生隐球菌H99建立实验性小鼠脑膜炎模型;4、免疫组化及免疫荧光方法检测CysLT1受体在脑组织中的表达。 结果: 1、本实验室构建的CysLT1基因敲除小鼠经在核酸及蛋白水平上检测鉴定,均不表达CysLT1受体;2、带有GFP的质粒通过基因枪轰击可整合入H99基因组内,筛选出的H99菌株可高水平稳定表达GFP;3、接种隐球菌后的野生型小鼠与假手术组小鼠相比,CysLT1受体在大脑皮层和海马神经元细胞中的表达明显增加,尤其在脑微血管中的表达显著升高。 结论: 1、成功制备CysLT1基因敲除小鼠模型及H99-GFP菌株,为探讨CysLT1受体在隐球菌H99侵入脑微血管的作用提供了有效的研究工具 2、首次发现小鼠感染隐球菌后脑微血管内皮细胞CysLT1受体显著表达,脑皮层和海马神经元细胞CysLT1受体的表达也明显增加,上述研究为后续相关课题的开展打下了重要基础。

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