几株植物内生菌抑制黄瓜和小麦白粉病的机理研究

作     者：霍云霞 

作者单位：西北农林科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄丽丽

授予年度：2009年

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

主      题：白粉病 植物内生菌 孢子萌发 菌落长度 防御酶 

摘      要：小麦(Triticum aestivum L.)和黄瓜(Cucumis sativus Linn.)是我国重要的粮食作物和蔬菜,然而白粉病是这两种植物生产上最重要的病害之一。目前生产上主要采用化学药剂防治该病害,但已发现白粉病菌对7类杀菌剂产生抗药性。生物农药具有无残留,对生态和环境安全的优点,可以完全或部分代替化学农药,因此,寻找安全有效并能降低对化学农药依赖性的生防菌剂来防治黄瓜和小麦白粉病的途径备受关注。本实验室经前期研究筛选出了对西葫芦白粉病有显著防治效果的两株内生放线菌PR1-8和GKSHJA和对小麦白粉病有显著防治效果的内生细菌E1R-J。本文在此基础上采用考马斯亮蓝染色法以及微分干涉光学显微镜观察的方法研究供试生防菌对黄瓜及小麦白粉病菌发育的影响,同时采用生理学的方法研究两株内生放线菌PR1-8和GKSHJA对黄瓜防御酶活性的影响,以期揭示其组织学和生理学机理,旨在为新型生物农药的研制和开发以及黄瓜和小麦白粉病的防治提供理论依据。获得以下重要结果: 1采用考马斯亮蓝染色法以及微分干涉光学显微镜观察两株植物内生放线菌PR1-8及GKSHJA发酵上清液对黄瓜白粉病菌发育的影响,结果表明:接种后48h,对照的孢子萌发率为91.1%,而经PR1-8及GKSHJA处理后仅为41.3%、32.2%;接种后96h,对照菌丝的平均长度达到745.1μm,处理后分别为134.5μm、111.6μm,并观察到菌丝扭曲、坍塌、膨大等畸形现象;对照在接种后120h平均每个分生孢子梗上着生有6-7个新生的分生孢子,发酵液处理后的在接种144h后分别仅有2-3个。 2通过测定两株内生放线菌PR1-8和GKSHJA对黄瓜叶片防御酶活性的影响。结果表明:经GKSHJA和PR1-8发酵上清液处理过接菌的叶片内的过氧化物酶、超氧化物歧化酶、苯丙氨酸解氨酶均明显上升,到第2-3d时其活性达到峰值时:POD比接菌对照分别提高了93.23%和76.73%;SOD比接菌对照分别提高了14.86%和11.08%;PAL比接菌对照分别提高了60.42%和35.88%。 3采用微分干涉光学显微镜观察植物内生细菌E1R-J发酵滤液对小麦白粉病菌的影响。结果表明:接种后12h,对照的孢子萌发率为93.33%、附着胞形成率为86%,而经发酵滤液处理后仅为50%、附着胞形成率为41.94%;接种后24h,对照的附着胞畸形率为7.75%,发酵滤液处理后附着胞畸形率升高到25.81%;接种后36h,对照的吸器原体的形成率为71.71%,发酵滤液处理后的为45.33%;接菌后96h,清水对照叶片上吸器的平均线性长度达到94.2μm,发酵滤液处理后的只有31.5μm;接种后72h,对照菌丝的平均长度达到340.8μm,发酵滤液处理后为135.2μm,同时观察到了菌丝扭曲等畸形现象;对照在接种后144h叶片上白粉病菌分生孢子串稠密,发酵滤液处理后的叶片上白粉病菌分生孢子串稀疏。