不同地区石榴皮游离态和结合态多酚成分分析与功能评价

作     者：原田 

作者单位：西北农林科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘邻渭

授予年度：2014年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 07[理学] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：石榴皮 游离态多酚 结合态多酚 成分 抗氧化 抗癌 

摘      要：石榴皮作为传统中药材，含有丰富的多酚类物质，对多种慢性疾病具有治疗和预防效。本研究选取国内四主产区10个品种石榴为原料，研究其果皮游离态与结合态多酚的含量、组成、抗氧化性及抗癌功能的异同，为科学利用石榴皮提取多酚提供依据。得到以下结果： （1）十个不同品种石榴皮中的游离态多酚、黄酮和单宁成分分别为104.17~200.91mgGAE/gDW（mg gallic acid equivalent/g dry weight）、23.12~54.5mgQUE/gDW（mgquercetin equivalent/g dry weight）和155.02~299.95mgTAE/gDW（mg tannin acidequivalent/g dry weight）;结合态多酚、黄酮和单宁分别为10.34~15.94mgGAE/gDW、2.89~5.17mgQUE/gDW和11.79~16.37mgTAE/gDW。各品种之间差异显著（p0.05）。游离态多酚含量与日照时间正相关，与降雨量和平均温度负相关，结合态多酚与气候无显著相关性。 （2）全皮、外层皮、内层皮和皮渣4种皮粉的游离态多酚、黄酮和单宁含量范围分别为107.55~157.60mgGAE/gDW、24.24~44.53mgQUE/gDW和143.03~224.65mgTAE/gDW，4种皮粉的结合态多酚、类黄酮和单宁含量分别为7.35~30.89mgGAE/gDW、2.24~11.80mgQUE/gDW和9.01~18.86mgTAE/gDW。4种皮粉的多酚含量差异显著（p0.05）,其中皮渣游离态多酚含量最低而结合态多酚含量最高。各石榴品种的同类皮粉的多酚含量差别显著（p0.05）。品种和取材部位的差异对多酚含量具有一定影响。 （3）各品种各取材部位的石榴皮均具有较强的抗氧化能力。游离态多酚的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、总还原力和总抗氧化力范围分别为55.13~109.89、77.72~118.91、87.91~177.60、136.85~275.44mgGAE/gDW。结合态多酚的这些能力范围分别为4.71~6.37、3.96~7.50、4.68~12.20、14.31~22.55mgGAE/gDW。试样多酚的含量与其抗氧化能力高度相关。 （4）HPLC检测结果显示，在游离态和结合态酚类组分中，安石榴苷B均为主要成分，含量最高。安石榴苷B和阿魏酸主要存在于游离态酚中，而表儿茶素和鞣花酸更多存在于结合态酚中。 （5）抗癌性评价结果表明，各产区的石榴皮多酚纯化物对结肠癌细胞具有细胞毒性，且效应呈多酚浓度依赖性，浓度为100μg/mL时对细胞24小时增殖的抑制率为39.3%。 AO/EB和DAPI染色结果说明各地区石榴皮的多酚纯化物均不同程度的引起了细胞凋亡。细胞凋亡通路蛋白表达结果表明多酚纯化物浓度100μg/mL时即可有效地通过多个信号通路诱导结肠癌细胞的凋亡。