碳纤维组分分离柱联用串联质谱快速筛选紫杉烷类化合物

作     者：马标 

作者单位：延边大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李东浩

授予年度：2017年

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 070303[理学-有机化学] 0703[理学-化学] 

主      题：紫杉醇 紫杉烷二萜类化合物 多维组分分离 ESI-QqQ-MSMS ESI-Q-TOF-MS 

摘      要：紫杉醇是从红豆杉属植物中分离出来的一种具有抗癌作用的二萜类化合物,因其独特的抗癌机理及其显著疗效而受重视;6-8-6-4环紫杉烷二萜类化合物由于具有紫杉醇基本骨架,能够通过有效方法转化成紫杉醇,而越来越受到关注。目前,分析天然物中紫杉醇类物质常用方法:乙醇萃取,经水和二氯甲烷溶剂震荡分层,之后蒸干二氯甲烷层,加入正己烷和甲醇震荡,甲醇层浓缩后进入检测器检测;或萃取后经固相柱净化,用大量溶剂洗脱,浓缩后进入高效液相分离检测器检测,而这些过程耗时耗力且环境不友好。本文利用碳纤维和活性碳纤维柱并联组成的多维组分分离系统,建立了一种能够快速对各类天然物中痕量紫杉烷类活性物质在线分离筛选的方法,并与串联质谱联用实现7种活性物质同时在线快速分析。天然物样品采用甲醇为溶剂、超声萃取,过滤后将萃取液直接进多维组分分离系统,将极性差异较大的10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、巴卡亭Ⅲ和7-木糖基-10脱乙酰基紫杉醇、7-木糖基-紫杉醇、三尖杉宁碱、紫杉醇及7-表-10-脱乙酰基紫杉醇7种目标物初步分离,同时去除弱极性的脂质、色素等干扰物;含紫杉烷类物质的组分直接通过串联质谱进行定性、定量分析。结果表明:该方法能够快速准确定性复杂植物样品中的紫杉醇及其系列物,有良好的准确度和重复性,7种目标物的松针加标回收率为75%～114%,RSD为1.40～8.06%(n=6);该方法测定紫杉醇在50 ng g-1～100μg g-1范围内有良好的线性,回归方程为y=1.593x+44.883,相关系数 R2=0.9994,LOD 为 25ngg-1,LOQ 为 75ngg-1,MDL为100ngg-1。常用方法检测紫杉醇60分钟才能分离检测一个样品,而此方法只需5分钟从复杂的样品中分离筛选7种紫杉烷类物质,是一种快速、高效、重现性好、洗脱所需有机溶剂用量少(40 μL)且操作方便、绿色环保的方法。此方法为高通量、自动化筛选紫杉烷类物质的新植物资源提供科学技术支撑。