H9N2亚型猪流感病毒对犬的致病性及在犬之间的传播特性研究

作     者：刘渊渊 

作者单位：山东农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：谢之景

授予年度：2014年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：H9N2亚型SIV 犬 致病性 

摘      要：近年来，关于犬感染流感病毒的报道日趋增多，犬能感染多种亚型的流感病毒如H3N8，H3N2，H5N1，H1N1和H5N2等，此外有研究证实犬对H9N2亚型禽流感病毒也是易感的，并且此病毒可以在犬与犬之间进行水平传播。基因序列分析表明H9N2亚型猪流感病毒（H9N2SIV）所有基因片段与早期H9N2亚型禽流感病毒高度同源。然而并没有关于H9N2SIV感染犬的报道。为了检测A/Swine/Shandong/JT/2007（H9N2SIV）对犬的致病性以及在犬与犬之间的传播特性，本试验采用常规病毒学方法、免疫学方法、病理学方法对试验犬的临床症状、体温、排毒、病理学变化等进行了检测。 1、H9N2SIVs对犬的致病性研究 在致病性试验中，4只犬分别用1ml注射器以滴鼻途径接种A/Swine/Shandong/JT/2007（H9N2SIV）病毒，每只犬接种107.67EID50/ml病毒尿囊液，每个鼻孔500ul，共接种1ml。每天观察试验动物的临床症状，从试验的第1d开始每天收集鼻拭子检测动物的排毒情况，在试验的3d、5d、7d、14d采集犬的血清检测抗体情况并分别在接种后5d、7d各扑杀1只犬，分别采取犬的各个内脏组织器官，固定在中性福尔马林中，制备切片并在显微镜下观察病变。致病性试验结果显示H9N2亚型SIV感染犬，能够引起犬体温升高、向外界排毒并引起轻微的流感样临床症状与病理变化并且能刺激机体产生抗体，但没有试验犬死亡。这表明：尽管H9N2亚型SIV能感染犬，但是对犬的致病性不强。 2、H9N2SIVs在犬中的传播特性研究 在传播性试验中6只犬，其中2只犬接种待测病毒，剂量为107.67EID50/ml病毒尿囊液，每个鼻孔500ul，共接种1ml作为感染组;24h后在同一饲养的笼子里放入4只健康犬作为哨兵动物，与已攻毒的2只试验犬进行混合饲养，同致病性试验一样，每天观察其临床变化，排毒、抗体情况及病理变化和病毒分布。传播性试验结果表明：哨兵动物没有表现明显的临床症状，但在2只哨兵犬的血清中检测到了抗H9N2亚型流感病毒抗体，并且在1只哨兵犬的气管、肺脏检测H9N2亚型流感病毒NP基因为阳性，这表明该病毒能够在犬与犬之间进行水平传播。 3、对照组试验 对照组4只犬，经鼻腔途径接种无菌PBS，每个鼻孔500ul共接种1ml。同致病性试验一样，观察其临床症状，排毒情况，体内抗体情况以及病毒在各内脏器官分布情况。 结果表明：对照组犬在整个实验过程中没有出现任何临床症状和病理变化。 综上所述： A/Swine/Shandong/JT/2007(H9N2)病毒株能够感染犬，不导致感染犬的死亡，但是此病毒可以在犬与犬之间进行水平传播。而犬作为伴侣动物与人们的关系密切，这警示我们应该对此给予高度关注。该研究为预防H9N2亚型SIV在犬中的传播和流行提供了实验数据。