不同鼠类宿主对伯氏疟原虫易感性的研究

作     者：苏胖胖 

作者单位：蚌埠医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：夏惠

授予年度：2016年

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主      题：伯氏疟原虫 细胞免疫 易感性 鼠类宿主 

摘      要：目的:建立不同鼠类宿主易感性的实验动物模型,观察不同鼠类宿主易感性的差异,探讨造成鼠类宿主易感性差异的机制。方法:(1)昆明小鼠、BALB/c小鼠、SD大鼠分为正常对照组和感染第1、3、5、7、9天组,感染组分别腹腔注射1×106个P.b(SD大鼠注射1×107个P.b),每组10只。(2)记录不同鼠类宿主的原虫血率、生存率以及脾脏湿重。(3)流式细胞术检测正常对照组和感染组外周血CD4+、CD8+、NK、NKT细胞比例变化。(4)ELISA法检测正常对照组和感染组外周血ARG、IFN-γ、IL-4含量的变化。(5)使用NO、NOS合酶检测试剂盒检测正常对照组和感染组外周血NO、NOS合酶含量的变化。(6)实时荧光定量PCR法检测正常对照组和感染组外周血TLR4、TLR9相对表达的变化。结果:1.昆明小鼠组和BALB/c小鼠组在感染P.b后原虫血率逐渐升高,最后全部死亡,而SD大鼠组在感染P.b第5天达到高峰,随后原虫血症逐渐消失。3种鼠类宿主分别与其正常对照组比较,昆明小鼠感染第1、3、5、7、9天组脾脏重量显著大于正常对照组(P0.01);BALB/c小鼠感染第1天组无统计学差异,感染第3、5、7、9天组脾脏重量显著大于正常对照组(P0.01);SD大鼠感染第1天组无统计学差异,感染第3、5、7、9天组脾脏重量大于正常对照组(P0.05)。2.昆明小鼠外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞比例与正常对照组比较,感染P.b第1、3、5天外周血CD4+T淋巴细胞比例升高(P0.05),感染第7天外周血CD4+T淋巴细胞比例降低(P0.05),感染第9天无统计学差异;感染P.b第1、3、5外周血CD8+T淋巴细胞比例降低(P0.05),感染第7天CD8+T淋巴细胞比例升高(P0.05),感染第9天无统计学差异。BALB/c小鼠外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞比例与正常对照组比较,感染P.b第1、3天CD4+T淋巴细胞比例升高(P0.05),感染第7天CD4+T淋巴细胞比例降低(P0.05),感染第5、9天外周血CD4+T淋巴细胞比例无统计学差异;感染P.b第1、3天CD8+T淋巴细胞比例降低(P0.05),感染第7天CD8+T淋巴细胞比例升高(P0.05),感染第5、9天无统计学差异。SD大鼠外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞比例与正常对照组比较,感染P.b第1天外周血CD4+T淋巴细胞比例升高(P0.05),感染P.b第3、5、7、9天外周血CD4+T淋巴细胞无统计学差,感染P.b第1天外周血CD8+T淋巴细胞比例降低(P0.05),感染P.b第3、5、7、9天外周血CD8+T淋巴细胞比例无统计学差异。3.昆明小鼠外周血NK、NKT细胞比例与正常对照组比较,感染P.b第1、3、5天外周血NK细胞比例升高(P0.05),第7天无统计学差异,第9天外周血NK细胞比例降低(P0.05);感染P.b第1、5天外周血NKT细胞比例无统计学差异,第3天外周血NKT细胞比例升高(P0.05),第7、9天外周血NKT细胞比例显著降低(P0.01)。BALB/c小鼠外周血NK、NKT细胞比例与正常对照组比较,感染P.b第1、7天外周血NK细胞比例无统计学差异,第3、5天外周血NK细胞比例升高(P0.05),第9天外周血NK细胞比例显著降低(P0.01);感染P.b第1天外周血NKT细胞比例无统计学差异,第3天外周血NKT细胞比例升高(P0.05),第5,7,9天外周血NKT细胞比例降低(P0.05).SD大鼠外周血NK、NKT细胞比例与正常对照组比较,感染P.b第1天外周血NK细胞比例升高(P0.05),第3天外周血NK细胞比例显著升高(P0.01),第5、7天外周血NK细胞比例升高(P0.05),第9天外周血NK细胞比例无统计学差异;感染第1天外周血NKT细胞比例升高(P0.05),第3、5、7、9天外周血NKT细胞比例均显著升高(P0.01)。4.昆明小鼠组NO、NOS、Arginase值与正常对照组比较,感染P.b第1天血清NO值显著升高(P0.01),第3、5天无统计学差异,第7、9天血清NO值降低(P0.05);感染P.b第1、3、5、7、9天血清NOS无统计学差异;感染P.b第1天血清Arginase值降低(P0.05),第3、5、7、9天血清Arginase值无统计学差异。BALB/c小鼠组NO、NOS、Arginase值与正常对照组比较,感染P.b第1天血清NO值显著升高(P0.01),第3、5天血清NO值无统计学差异,第7、9天血清NO值降低(P0.05);感染P.b第1、3、5、7、9天血清NOS值无统计学差异;感染P.b第1、3天血清Arginase值降低(P0