掺伪芝麻油、花生油qPCR检测技术

作     者：朱立娜 

作者单位：河南工业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吴兴泉;庞淑敏

授予年度：2015年

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083202[工学-粮食、油脂及植物蛋白工程] 

主      题：掺假 荧光定量PCR 检测 

摘      要：随着生活水平的日渐提高,我国人均食用油的消费量也在不断的增加,需求量的增加带动了食用油行业的蓬勃发展,同时也促进了经济的增长。然而强大的市场也助长了不法分子谋取暴利的野心。近些年来,食用油掺假现象层出不穷,此种行为严重损害了消费者的合法权益,同时还对其身体健康造成威胁,然而针对这些情况目前并没有统一且可靠地检测方法。本研究运用.常规 PCR 技术及 qPCR(Real-time Quantitative PCR Detecting System)技术,芝麻油、花生油作为目的油脂,大豆油作为掺伪油脂,选择市售的不同品牌的芝麻油及花生油作为实验样品,从植物油DNA提取方法优化、定性及定量方法等方面进行了研究。本研究结果分析主要包括以下几个方面(1)通过温度梯度PCR技术筛选出了花生、芝麻、大豆种属特异性基因引物;(2)通过对比人工提取方法(SDS法、CTAB法、己烷乳化法)及试剂盒法植物油DNA提取的质量及数量,优化出了提取效果较好的试剂盒法并对其进行改良,提高了提取效率;(3)利用荧光PCR产物Tm值(熔解温度)特异性,建立掺伪植物油定性检测方法;(4)5倍梯度稀释植物油DNA,建立浓度梯度标准曲线,对未知油样掺伪程度进行测定。