赤丹丸的提取工艺及提取物的药效学研究

作     者：阮国虎 

作者单位：中国医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：菅凌燕

授予年度：2007年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：OECDP 正交试验 慢性盆腔炎 药效学 

摘      要：目的 为了制备出疗效更好、服用更方便、更符合现代标准的中成药，我们对赤丹丸(Chi dan pill CDP)的提取工艺进行优化改进，并对应用优化工艺提取的物质进行药效学研究，为赤丹丸的进一步研究提供理论依据。 方法 一、提取工艺 采用L(3)正交水平表进行试验，以提取物中芍药苷、丹参酮ⅡA的含量为考察指标，考察乙醇浓度(A)、溶剂(乙醇、水)用量倍数(B)、提取时间(C)三种因素对提取结果的影响，从而筛选出最佳的工艺条件。 二、芍药苷、丹参酮ⅡA含量的测定—反相高效液相法 1、芍药苷含量测定的方法 色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C(4.6×150 mm，5μm)柱，以乙腈-水-磷酸(17：83：0.1)为流动相，流速为1ml·min，检测波长230nm，柱温为30℃。 2、丹参酮ⅡA的测定方法 色谱柱为Agilent EclipseXDB-C(4.6×150mm，5μm)柱，流动相组成为水-甲醇(25：75)，流速为1ml·min，检测波长为270nm，柱温为25℃。 三、药效学试验 赤丹丸提取物(Optimum extract of chidan pill OECDP)对慢性盆腔炎模型大鼠的作用。采用苯酚胶浆致炎剂诱导的慢性盆腔炎模型大鼠，将模型大鼠分为OECDP大剂量组、中剂量组、小剂量组、CDP组、正常组、模型组、妇炎康组。光镜下观察大鼠子宫的组织学形态，放免法测定血清中白细胞介素Ⅱ(IL-2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量，测定全血的血液流变学，观察有关各项指标的变化。初步探讨OECDP对CPID的作用机制。 观察对小鼠耳廓肿胀和大鼠足肿胀炎症模型的影响，考察其抗炎作用;对小鼠热板法和醋酸扭体法所致动物疼痛反应的抑制作用，考察其镇痛作用;通过小鼠耳廓毛细血管的变化，考察其对微循环的作用。 结果 一、建立了赤丹丸的最佳提取工艺 采用8倍量的75％乙醇回流1.5h，然后用10倍量的水再回流1.5h。通过此工艺得到的提取物中芍药苷、丹参酮ⅡA含量最高。 二、药效学试验表明 该提取物能够降低小鼠的痛阈，减少小鼠的扭体次数;能减轻耳、足肿胀的程度;能够增加小鼠耳廓毛细血管的开放数量，扩张末梢动静脉的口径;能改善模型大鼠的血液流变学，缓解宫腔粘连闭塞或扩张，减轻子宫组织中炎细胞的浸润，纤维结缔组织的增生，治疗组较模型组，IL-2水平显著升高，TNF-a水平有所降低。 结论 1、采用8倍量的75％乙醇回流1.5h，然后用10倍量的水再回流1.5h。此工艺得到的提取物中有效成分含量高、稳定、重现性好。 2、OECDP有明显的抗炎、镇痛和改善微循环的作用;并对慢性盆腔炎有治疗作用;OECDP的疗效强于CDP。