黄瓜涝胁迫下超微结构变化及差异蛋白组学研究
作者单位:扬州大学
学位级别:硕士
导师姓名:陈学好
授予年度:2016年
学科分类:09[农学] 0904[农学-植物保护] 0902[农学-园艺学] 090202[农学-蔬菜学]
摘 要:涝胁迫是人类所面临的最严重的自然灾害之一,严重制约植物的生长。黄瓜是我国第三大广泛栽培蔬菜,根系浅,通气组织不发达,极易受到涝胁迫危害。本研究以耐涝黄瓜品系’早二N’为材料,电镜对涝胁迫下黄瓜超微结构进行观察,利用iTRAQ技术对涝胁迫诱导的差异蛋白质进行研究,以期揭示黄瓜应对涝胁迫生理机制和分子生物学机理,主要研究结果如下:1、淹涝对早二N粒体结构影响较小,进一步加琼脂淹涝后,线粒体膜结构消失,内部结构发生降解,内嵴消失;淹涝后叶绿体被压缩变形,片层结构逐渐松散,且胁迫强度加大,片层结构松散越快;气孔随涝胁迫时间增长逐渐闭合,两种不同胁迫强度下,初期差异不明显,在淹涝后期差异较为显著。2、本次iTRAQ试验共检测到5574个蛋白,淹涝和加琼脂淹涝两个处理中检测到差异蛋白分别为97和87个;检测到差异蛋白主要参与的生物进程为细胞过程(cellular process)和应激响应(response to stimulus),主要分子功能是结合(binding)和催化活性(catalyticactivity)。COG功能分类结果表明,在加琼脂淹涝中,碳水化合物运输和代谢蛋白变多。3、淹涝和加琼脂淹涝下共有差异蛋白44个,能进行功能预测的有34个蛋白,在加琼脂淹涝中继续上调或下调有21个蛋白;加琼脂淹涝后独有的参与应急响应的上调差异蛋白有13个。4、对候选差异蛋白进行qRT-PCR表达验证,结果表明富含半胱氨酸的类受体蛋白激酶26、UDP-糖基转移酶92A1、呼吸爆发氧化酶同源蛋白B表达量在处理后不同时间点淹涝处理均显著高于对照,且随淹涝水层增加而逐渐增加。说明涝胁迫促进这三个蛋白的表达,这三个蛋白可能是涝胁迫诱导黄瓜产生的重要蛋白。