营养限制与补偿对蒙古羔羊脂肪组织脂肪代谢及相关炎症反应基因的影响

作     者：路新星 

作者单位：内蒙古农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王海荣;杨金丽

授予年度：2016年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：营养限制 营养补偿 脂肪组织 脂肪合成基因 脂肪因子 

摘      要：内蒙古是我国的畜牧大省,持续增加的家畜数量与草原生产力下降的尖锐矛盾使得放牧家畜常遭受生长限制,而营养丰富时又会表现出不同的补偿生长。脂肪组织是协调机体能量代谢、炎症反应与免疫机能的重要器官,对于维持机体营养与免疫的平衡具有重要意义。蒙古羔羊在生长限制与补偿过程中机体脂肪组织会发生显著变化,然而不同部位脂肪组织的脂肪因子和相关炎症反应变化的研究到目前为止报道较少。本实验研究了营养限制与补偿对蒙古羔羊皮下和内脏脂肪组织中代谢和免疫相关因子基因表达量的变化。实验选用20只4月龄健康蒙古公羔羊,随机分为对照组(ME8.95MJ/kg, CP 10.68%)与限制组(ME 7.84MJ/kg, CP 8.28%)限制期60d,限制饲养结束后立刻进入60d补偿期,两组饲喂相同日粮(ME 9.85MJ/kg, CP 12.22%)分别在限制和补偿末期选取与各组平均体重接近的5只羔羊进行屠宰,采集腿脂、大网脂和肾脂,荧光定量PCR检测过氧化物酶增殖物激活受体丫(PPARy)、固醇调控元件结合蛋白1(SREBP1)、乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)、脂肪酸合成酶(FASN)、脂滴蛋白(Perilipin)、脂联素(Adiponectin)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素6(interleukin 6)、白介素1(interleukin1β)基因表达量。于试验第30、60、90和120天从各组试验羊颈静脉采血,应用试剂盒检测血清中甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)、葡萄糖(Glu)、胰岛素(INS)浓度。试验结果表明：(1)限制水平饲喂时对照组体重平稳上升,限制结束时由初始体重22.22kg增重到33.84kg,平均日增重0.193kg/d,而限制组蒙古羔羊体重基本维持不变。补偿期时限制组羔羊90d和120d时平均日增重分别为0.269kg/d和0.294kg/d,比对照组平均日增重分别高出0.084kg/d和0.077kg/d,限制组羔羊平均日增重显著高于对照组(P0.05),补偿结束时限制组羔羊体重恢复至37.83kg。(2)本试验条件下,限饲时脂肪分化调控基因PPARγmRNA表达量在腿脂和大网脂显著降低(P0.05),而SREBP1 mRNA表达量仅在腿脂降低(P0.05)。脂肪合成基因ACACA mRNA与FASN mRNA表达量限制组在腿脂,大网脂和肾脂三个脂肪部位均显著低于对照组(P0.05),脂肪合成能力下降。Perilipin mRNA表达量限制组显著降低(P0.05)表明机体脂肪动员增加。脂肪因子中Adiponcetin mRNA的表达有着组织特异性,在大网脂显著降低(P0.05)。Leptin mRNA限饲时腿脂,大网脂和肾脂限制组表达量均显著低于对照组(P0.05)。TNFamRNA表达量在腿脂限制组显著升高(P0.05)。而IL-6 mRNA在腿脂和大网脂有不同表现,在腿脂显著降低(P0.05),大网脂则显著升高(P0.05)。IL-1βmRNA表达量在三个脂肪部位均显著提高(P0.05)。恢复补偿后SREBP1 mRNA表达量限制组在大网脂和肾脂显著升高(P0.05),而ACACA仅在大网脂表达升高(P0.05)。Adiponcetin, Leptin与TNFa补偿后在肾脂则显著降低(P0.05)。(3)检测限饲30d和60d羔羊血液中的甘油三酯,发现与对照组相比限制组甘油三酯浓度显著降低(P0.05)。而在补偿阶段,限制组甘油三酯浓度恢复到对照组水平,差异不显著。经过限饲发现在30d时血液中NEFA浓度限制组显著高于对照组(P0.05),限制末期时与对照组差异不显著。补偿作用时NEFA浓度两组之间差异不显著。限制与补偿时总胆固醇浓度在两组间差异不显著。本试验发现限饲时限制组血糖浓度显著低于对照组(P0.05),而调控血糖的胰岛素在限饲时同样限制组低于对照组,差异显著(P0.05)。补偿期血液葡萄糖浓度在两组间差异不显著,胰岛素浓度同样恢复到对照组水平。本试验条件下,营养限饲时体内脂肪动员,脂肪代谢发生明显变化。限饲时脂肪分化调控基因(PPARy与SREBP1),合成基因(ACACA与FASN),脂解基因(Perilipin),内分泌(Adiponcetin与Leptin)和炎症因子(TNFα、IL-6与IL-1p)基因在不同脂肪部位有着不同变化,内分泌和炎症因子的改变参与到了脂肪代谢的调控。