越南起源食蟹猴MHC-Ⅱ类基因的多态性研究

作     者：韦丽琼 

作者单位：华南理工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王小宁

授予年度：2011年

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主      题：食蟹猴 MHC-II类 高频等位基因 多态性 

摘      要：主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex,MHC）在细胞免疫中起着关键作用,且MHC分子的多态性会导致不同个体对病毒感染或药效产生不同的反应。虽然食蟹猴（Macaca facicularis,Mafa）已广泛用于医学和药学的研究,但是目前关于食蟹猴MHC分子多态性的研究仍旧十分有限。本文利用实验室保存的越南起源食蟹猴群体资源,分别从DNA及mRNA水平,揭示180多只食蟹猴MHC-II类基因外显子2的多态性,阐明了食蟹猴MHC-II类各等位基因在群体中的分布规律,为食蟹猴作为疾病动物模型、疾病研究及疫苗设计提供重要线索。结果如下: （1）从DNA水平,采用PCR产物直接测序的方法在150只食蟹猴群体中鉴定了34个Mafa-DQB1等位基因,8个为新的等位基因和1个高频位点;16个Mafa-DPB1等位基因,5个为新的等位基因和3个高频位点;16个Mafa-DOB等位基因,全部为新的等位基因和4个高频位点。所有这些等位基因很好地补充了有限的越南起源食蟹猴的免疫遗传信息。在本文所研究的种群中,高频等位基因Mafa-DOB*010102,Mafa-DPB1*13和Mafa-DQB1*0616,可能代表着一种机体内重要的免疫功能的靶点。采用Pool筛选克隆测序的方法,鉴定了29个Mafa-DRB1等位基因,4个为新的等位基因和1个高频谱系。有16个Mafa-DRB1等位基因与其他群体、恒河猴或其它的猕猴属的等位基因共享。共享和独特的MHC-Ⅱ类DNA序列特征可能对研究疾病有非常重要的作用,并且有助于更好地阐明非人灵长类动物的生物地理学特征和差异。 （2）从转录水平,采用cDNA克隆测序的方法在30个食蟹猴个体中鉴定到Mafa- DRB1等位基因39个,8个为新的等位基因和3个高频等位位点。在31个个体中鉴定到22个Mafa-DQB1等位基因,1个为新的等位基因和3个高频位点。对Mafa-DRB1进行单倍型分析,鉴定到14种DRB1单倍型,有2种单倍型与其他地理种群共享。在2个个体中检测到Mafa-DRB1-DQB1等位基因的组合,该组合在其他种群中已有报道。这些共表达的等位基因可能是某些疾病风险的标记,它们在生物标记的靶标筛选或新疗法的发展中具有重要的临床评估价值。