雌激素水平改变与雌性大鼠膀胱逼尿肌活动关系的研究

作     者：郭浩轶 

作者单位：昆明医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘孝东

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：尿流动力学 雌激素 BK通道 ASIC3 AQPs 

摘      要：目的：探讨去势是否可以导致雌性大鼠膀胱逼尿肌的尿流动力学改变;去势是否可以导致雌性大鼠膀胱组织学的改变及其改变的特点;去势是否可以导致膀胱组织中某些活性分子：如BK通道、水通道蛋白(AQPs)、酸敏感通道蛋白3(ASIC3)基因及蛋白的表达改变,这些改变是否与其尿流动力学改变有关。研究大鼠膀胱组织中BK通道、水通道蛋白(AQPs)、酸敏感通道蛋白3 (ASIC3)表达的变化及与膀胱逼尿肌活动的关系,明确BK通道、水通道蛋白(AQPs)、酸敏感通道蛋白3(ASIC3)与尿路刺激症的关系。为临床尿路刺激征以及OAB的治疗提供新的研究思路。方法：选取成年雌性大鼠,通过对大鼠行双侧卵巢切除术及补充外源性尼尔雌醇的方法构建大鼠雌激素缺乏模型。分组情况如下：将所有大鼠随机分为对照组、去势组、尼尔雌醇组。适应性饲养6d后,对对照组大鼠行双侧卵巢探查术,将除对照组外的其余2组大鼠均给予卵巢切除。所有大鼠行膀胱造瘘,造瘘管外端固定于大鼠颈部,清醒后饲养待用。对尼尔雌醇组予灌服尼尔雌醇混悬液1mL/100g(1.5mg/kg体质量),每周1次,连续4周。其余时间用等体积生理盐水灌胃。对对照组及去势组则予灌服生理盐水1mL/100g,每日1次,连续4周。对三组大鼠进行尿流动力学检测。同时取三组大鼠的膀胱组织,进行病理学检查。并通过RT-PCR和western-blot方法检测其BK通道、水通道蛋白(AQPs)、酸敏感通道蛋白3(ASIC3)基因、蛋白表达的差异。结果：尿流动力学提示：对照组大鼠储尿期及排尿期未见明显不稳定收缩;去势组在储尿期可见不稳定收缩,与对照组相比：排尿间隔明显缩短(P0.01),排尿次数明显增加(P0.01);尼尔雌醇组与去势组相比,不稳定收缩次数较少,排尿次数减少、排尿间隔延长(P0.05)。病理学检测提示去势组中大鼠膀胱粘膜破坏;RT-PCR及western-blot提示：去势组与对照组相比膀胱上BK通道的基因、蛋白表达表达明显降低(P0.01),ASIC3的基因、蛋白表达表达明显升高(P0.01),AQPs的基因、蛋白表达无明显变化。尼尔雌醇组BK通道的基因、蛋白表达表达高于去势组(P0.05),低于对照组(P0.05);ASIC3的基因、蛋白表达高于对照组,P0.05;低于去势组,P0.05)。结论：1.去势可以导致雌性大鼠膀胱逼尿肌不稳定收缩,使其产生明显的尿路刺激症状,补充外源性雌激素后症状可缓解;2.去势可以导致雌性大鼠膀胱粘膜的组织学改变,这些改变可能是其尿流动力学改变的病理学基础;3.去势雌性大鼠膀胱组织上BK通道蛋白的基因及蛋白表达较正常大鼠降低,补充外源性雌激素后可升高,但达不到正常水平;4.去势雌性大鼠膀胱组织上ASIC3的基因及蛋白表达较正常大鼠增高,补充外源性雌激素后可降低,但达不到正常水平;5.雌性大鼠膀胱内BK通道表达降低和ASIC3表达升高与膀胱逼尿肌反射亢进密切相关。6.外源性雌激素可能成为潜在的治疗绝经后妇女膀胱逼尿肌反射亢进的药物