S-腺苷-L-甲硫氨酸的分离纯化及其硫酸盐制备的研究

作     者：杨羽辉 

作者单位：浙江工商大学 

学位级别：硕士

导师姓名：于平

授予年度：2014年

学科分类：081702[工学-化学工艺] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

主      题：S-腺苷-L-甲硫氨酸 SAM 细胞破碎 D113弱酸性阳离子交换树脂 离子交换 分离纯化 SAM硫酸盐 SAM硫酸盐的稳定性 

摘      要：S-腺苷-L-甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,简称SAM, SAMe或AdoMet)是一种重要的中间代谢产物,广泛存在于各种生物体中,也是人体内一种重要的生理活性物质。本文主要研究了破碎细胞抽提SAM的方法;SAM的分离纯化;SAM硫酸盐的制备;SAM硫酸盐的稳定性。 对破碎细胞抽提SAM的方法进行研究表明,采用甲酸进行破碎抽提效果最好,优化得出最佳破碎提取条件：甲酸浓度：0.5mol/L,甲酸用量：1.25BV发酵液体积,破碎时间：90min。SAM提取率以高氯酸的破碎率为1,能达到95%以上。 采用离子交换法从细胞提取液中分离纯化SAM。此法相对于传统的使用苦味酸,苦酮酸选择沉淀SAM的方法,提高了SAM的回收率,而且减小了操作的危险性和对环境的污染。研究得出SAM提取液在D113弱酸性阳离子交换树脂上的SAM最佳上柱初始pH值为5.0。以硫酸作为洗脱剂洗脱SAM,得出最佳洗脱条件为0.2mol/L的硫酸,流速2BV/h。SAM洗脱效率为90.3%。 采用有机反相沉淀的方法制备SAM硫酸盐,优化SAM硫酸盐的结晶工艺。通过实验得到,选用80%甲醇浓度比例,甲醇用量5BV进行结晶,该条件下结晶状况最好。SAM硫酸盐回收率达到70%以上,产品纯度达到91.05%。 SAM硫酸盐的稳定性仍受pH和温度的影响。但温度对SAM硫酸盐的稳定性影响较大,随温度升高,降解速率明显加快,损失量显著增加。因此,SAM硫酸盐的保存应在低温(0℃)下保存。 本文旨在完善SAM分离纯化工艺,提高SAM破碎提取率,优化整条工艺流程,减少SAM损失,为SAM工业化应用打下良好基础。