前列腺干细胞抗原在前列腺组织中的表达

作     者：郎根强 

作者单位：第二军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孙颖浩;钱松溪;王林辉

授予年度：2002年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：前列腺干细胞抗原 正常前列腺 前列腺增生 前列腺癌 原位核酸分子杂交 

摘      要：[背景] PSCA是最近发现的一个前列腺癌相关肿瘤抗原，因与SCA-2有30％同源性而得名，后者为Thy-1/Ly-6细胞表面抗原家族成员之一，其生理功能目前尚不清楚。PSCA有很高的前列腺组织特异性，其mRNA局限性表达在正常前列腺上皮的基底细胞层。文献报告，CaP组织中的80％4％较正常前列腺组织表达增高，且在激素依赖与HIPCA之间无显著差异。骨转移灶中100％高表达且其表达水平较原发灶更高。但迄今为止，尚未见对各种前列腺组织的PSCA表达水平进行系统对照研究的报告。 [目的] 本课题旨在利用ISH技术，检测PSCA mRNA在正常前列腺、BPH与CaP等三种典型前列腺组织中的表达水平，研究三者之间表达差异及其意义。为探讨PSCA在CaP临床诊断与免疫治疗方面的应用价值提供实验基础。 [方法](1)根据Genebank提供的PSCA mRNA全长序列，设计并合成5’端及3’端引物。从高表达的CaP细胞株PC3细胞中抽提总RNA，采用RT-PCR的方法，克隆出PSCA基因编码框中部分片段(339bp/372bp)，并装入pMD18-T克隆载体。转染JM109大肠杆菌，扩增后酶切、测序证实;(2)将目的基因片段转入含特异性SP6/T7 RNA聚合酶启动子序列的pcDNA3载体，用体外转录法制备地高辛标记的反义cRNA探针;(3)采用ISH技术，对9例正常前列腺、20例BPH及26例CaP标本的PSCA mRNA表达水平进行了检测。 [结果] 正常前列腺、BPH及CaP组织PSCA mRNA表达阳性率分别为66.7％、70.0％及84.6％，强阳性率分别为0％、10％及57.7％。正常前列腺标本及绝大部分BPH标本PSCA mRNA表达局限于前列腺上皮的基底细胞层。部分BPH标本在基底细胞及外分泌细胞均有高表达。CaP标本PSCA mRNA主要表达于癌细胞，细胞间质和肌肉组织均无表达。统计学分析显示：正常前列腺与BPH组织PSCA mRNA表达水平无显著差异;CaP与正常前列腺、 BPH组织PSCA mRNA表达水平均有显著差异;CaP临床Jewett-Whitmore-Prout分期、细胞Mostofi分级与PSCA mRNA表达水平均无相关性。 [结论](1)PSCA是正常前列腺上皮细胞高度特异性表达的抗原，其表达具有局限于基底细胞层的特点;(2)BPH基本不影响PSCA的表达水平;(3)PSCA特征性的高表达于CaP细胞，且各型CaP之间具有表达一致性;(4)PSCA可能在CaP早期诊断与免疫靶向治疗方面有应用前景。