pH敏感释药的肝靶向型树形聚合物前药的合成及其毒性研究

作     者：高峰 

作者单位：华东师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：罗淑芳

授予年度：2009年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：pH敏感 聚乙二醇 树形聚合物 阿霉素前药 

摘      要：分别以聚乙二醇胺(HO-PEG-NH)、聚乙二醇单甲醚胺(mPEG-NH)和聚乙二醇二胺(NH-PEG-NH)一端胺基为核发散法合成了新型聚酰胺-胺(PAMAM)树状聚合物,其中HO-PEG-NH和NH-PEG-NH的另一端用半乳糖酸修饰引入肝靶向基团半乳糖。将阿霉素(Dox)通过酸易降解腙键链接到PAMAM树状聚合物上,得到了新型pH敏感释药大分子前药。用红外(FT-IR)、核磁氢谱(H-NMR)、紫外可见光谱(Uv-Vis)、蒽酮比色法等对前药结构进行了表征。用透析法研究了前药在不同pH缓冲溶液中的药物释放行为,并用噻唑兰(MTT)检测法,荧光染色法评价了前药的细胞毒性。将前药载体端基羧基化后和钆配合,尾静脉注射入小白鼠体内,通过核磁共振成像(MRI)研究前药载体在肝部的代谢来研究前药载体的靶向性,建立了裸鼠肿瘤模型,并进行了体内实体瘤抑制实验来研究前药对肿瘤的毒性和靶向性。 结果表明:树形聚合物阿霉素体前药的体外释药放行为表现出明显的pH值依赖性,介质pH值越大释药速度越慢。一定时间内,细胞毒性按聚乙二醇单甲醚嵌段聚酰胺-胺前药(mPEG-b-PAMAM-Dox)半乳糖基化聚乙二醇嵌段聚酰胺-胺前药(Gal-PEG-b-PAMA-M-Dox)Dox依次递增,随着时间延长大分子前药进入细胞的溶酶体,在溶酶体的酸性环境中(pH5.6)快速释放药物,游离阿霉素浓度变大,对细胞的杀伤力增加,接近于等浓度阿霉素的毒性。半乳糖基化聚乙二醇嵌段聚酰胺-胺前药载体钆配合物(Gal-CONH-PEG-b-PAMAM-Gd)对小白鼠肝部有明显的造影增强效果;聚乙二醇单甲醚嵌段聚酰胺-胺前药载体(mPEG-b-PAMAM-Gd)对小白鼠肝部信号增强的衰减速度明显大于Gal-CONH-PEG-b-PAMAM-Gd对小白鼠肝部信号增强的衰减速度,说明Gal-CONH-PEG-b-PAMAM-Gd与小白鼠肝区有一定亲合性,能在肝部富集,对肝呈现一定的靶向效果。尾静脉注射阿霉素大分子前药后肿瘤生长得到了抑制,且有半乳糖靶向基团的前药肿瘤抑制能力强。以上研究结果表明该pH敏感释药的聚合物前药在癌症靶向治疗领域有较大潜在应用前景。