黄曲霉MAPK通路相关基因功能初步研究

作     者：李声明 

作者单位：福建农林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：袁军;汪世华

授予年度：2015年

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主      题：黄曲霉 黄曲霉毒素 MAPK 敲除 

摘      要：黄曲霉(Aspergillus favus)是一种常见的腐生真菌,极易污染花生和玉米等农作物,其产生的黄曲霉毒素(Aflatoxins,AF)对动物和人类具有强烈的致畸和致癌作用,在世界范围内造成了巨大的经济损失和健康危害。目前黄曲霉毒素合成的过程已经清楚,但是外界信号刺激如何调控黄曲霉的生长和黄曲霉毒素的合成目前还不是非常清楚。本研究基于酵母和构巢曲霉等真菌中已有的研究结果,对黄曲霉MAPK信号途径相关基因在黄曲霉生长发育和侵染过程的功能进行了初步研究。通过基因敲除技术,成功构建了△fus3和△ste11两个敲除突变体。表型分析的结果表明,敲除fus3或者ste11基因导致黄曲霉产孢量减少,在逆境下也无法形成菌核,但是敲除这两个基因对黄曲霉的生长速率并没有明显变化。薄层层析结果显示两个突变体黄曲霉毒素合成都出现了不同程度的减少,侵染实验证实了△fus3和△ste11突变体侵染花生的能力明显下降。同时我们构建了互补载体以及氨基酸定点突变的载体,为下一步探索磷酸化位点的作用奠定了基础。综合上述结果,本研究初步证实了 MAPK通路相关基因在黄曲霉生长发育、致病性以及黄曲霉毒素合成过程发挥重要作用,有助于我们进一步深入探讨外界信号刺激调控黄曲霉的生长和黄曲霉毒素合成的作用机制,为进一步预防黄曲霉和黄曲霉毒素带来的危害提供理论基础。