三种中草药单体抑制血管新生的功能与机理研究

作     者：卢彬彬 

作者单位：华东师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘明耀;易正芳

授予年度：2010年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：肿瘤 血管新生 人脐静脉内皮细胞 高三尖杉酯碱 斑蝥素 信筒子醌 人前列腺癌 

摘      要：本研究在前人研究的基础上,通过体外、体内、疾病模型、分子机理四个不同水平的研究,从八个中草药单体中筛选出三个具有抑制血管新生潜能的单体：高三尖杉酯碱(Homoharringtonine, HHT)、信筒子素(Embelin)以及斑蝥素(Cantharidin,CDT)。 高三尖杉酯碱,存在于三尖杉属(Cephalotaxus harringtonia)植物的叶、根及种子中。在体外细胞实验中,高三尖杉酯碱对人脐静脉内皮细胞的增殖有显著的抑制作用,而对迁移和成管影响较弱。在半离体的动脉环试验中,100nmol/L的剂量就可以非常明显地抑制胸主动脉微管的形成和向外生长。小鼠角膜实验中,0.1μg/颗粒的高三尖杉酯碱能抑制VEGF诱导的血管新生。在讲一步的在肿瘤模型中,我们发现1mg/kg·d剂量的高三尖杉酯碱能够显著抑制裸鼠人前列腺癌肿瘤的生长,并且抑制肿瘤内部的血管新生。在分子机制的探索和研究中发现,高三尖杉酯碱能抑制VEGF诱导的ERK1/2和p-38MAPK蛋白的磷酸化;显著降低CDK2、Cyclin D1、Cyclin B1以及CDC-2等周期相关蛋白,从而阻滞细胞周期,抑制内皮细胞的增殖。 斑蝥素(Cantharidin,CDT),来自鞘翅目(Coleop tera)芫菁科(Meloidae)斑芫菁属(Mylabris)的药用昆虫一斑蝥。斑蝥素能够抑制内皮细胞的增殖、迁移和成管。在小鼠角膜微囊袋实验中,0.1μg/颗粒的斑蝥素能够抑制由VEGF诱导的血管新生。流式细胞仪检测发现10μmol/L斑蝥素可以明显地诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡和死亡。 信筒子醌(Embelin),来自紫金牛科(Myrsinaceae)酸藤子属(Embelia)植物百花酸藤果(Embelia ribes Burm.F.)。信筒子醌可以明显地抑制人脐静脉内皮细胞的增殖、纵向迁移以及成管,但是对人脐静脉内皮细胞横向迁移抑制效果较弱。10mg/kg·d剂量的信筒子醌原位皮下注射20d,可以显著抑制裸鼠人前列腺癌肿瘤的生长,并且抑制肿瘤内部的血管新生。 总之,本研究筛选出三种具有抑制血管新生功能的中草药单体,它们在体外和体内均能抑制血管新生。本课题还对其中的一种单体(高三尖杉酯碱)的抗肿瘤血管新生作用进行了初步的分子机理研究。相信本课题能够为这三种中草药单体开发成为抗血管新生药物奠定良好的基础。