腧穴解郁方干预对抑郁大鼠脑内Raf1和p-ERK的影响

作     者：卢庭 

作者单位：山西中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：燕平

授予年度：2017年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：腧穴解郁方 抑郁症 针刺 Raf1 p-ERK 

摘      要：目的本实验通过观察在腧穴解郁方干预下抑郁模型大鼠行为学方面的改变和抑郁大鼠前额叶皮层、海马内Raf1及p-ERK的影响变化,继续深入的研究腧穴解郁方在治疗抑郁症中关于ERK信号通路中所发挥的治疗作用机制,为临床上腧穴解郁方对抑郁症干预治疗的作用机制提供更多科学可靠的研究依据。方法把30只健康的雄性清洁级的SD大鼠随机的分成3个组,即空白对照组（n=10）、模型组（n=10）和针刺组（n=10）,实验开始的前1天,3组大鼠均行旷场实验,糖水实验,称体重,记录这些行为学的表现情况;实验进行的过程当中,空白对照组正常的对其喂养,不予以造模的刺激;模型组和针刺组均用单笼饲养结合不可预知温和刺激来制备大鼠抑郁模型,刺激源共选择了7种,每日则随机性的选择1种方式,共要接受连续21天的不同应激的造模。针刺组于每日开始造模的前1h电针腧穴解郁方（百会+神门+太冲）,每日1次,每次20分钟,一共连续电针干预治疗时间是21天,抓取和固定模型组,不予针刺操作,其他处理则跟针刺组的相同,空白对照组也不予以任何的处理。实验结束后再次将各组大鼠行旷场实验,糖水实验,称体重等行为学测评并做好记录,麻醉断头处死大鼠,迅速解剖,取出大鼠脑内海马和前额叶皮层,-80℃冰箱保存到待测时候。检测时选择了酶联免疫吸附的方法来对大鼠的前额叶皮层和海马内的Raf1、p-ERK的含量改变进行测验。结果1.行为学评分:实验开始之前,3组大鼠在旷场实验方面、糖水实验、体重方面的行为的比较都没有统计学的差别（P0.05）。实验结束之后,在旷场实验的水平穿越数和垂直竖立的次数、糖水实验方面、大鼠的体重方面,模型组与空白对照组进行比较,评分数据均明显的下降,有显著性的差别（P0.01）,提示此次的抑郁模型制备获得了成功。在旷场实验、糖水实验方面,针刺组与模型组进行对比,评分则有明显的升高,对比则是有显著性的差别（P0.01）,在大鼠的体重方面,针刺组与模型组进行对比,所得结果则是有升高,差别有着统计学意义（P0.05）,提示了电针腧穴解郁方干预抑郁的大鼠对其行为学各方面有着改善和治疗的效果。2.脑内Raf1及p-ERK含量的变化海马内:与空白对照组作对比,模型组的大鼠其海马内Raf1和p-ERK的含量均有着明显的减低（P0.01）,有显著的统计学差别;而与模型组作比较,针刺组的大鼠其海马内Raf1和p-ERK的含量均明显有了升高（P0.01）,差别有显著的统计学意义。额叶皮层内:模型组的大鼠其Raf1及p-ERK的含量都明显的低于空白对照组的（P0.01）,差别有显著性的意义;而针刺组与模型组作对比,Raf1及p-ERK的含量则有了明显的提高（P0.01）,比较有着显著性的差别。结论1.单笼饲养与慢性不可预知温和的刺激相结合能对大鼠在行为学的方面起到降低的作用,使大鼠产生了抑郁症状;针刺腧穴解郁方进行干预则能够改善抑郁大鼠在行为学方面的水平表现。2.抑郁的大鼠其脑内的前额叶皮层、海马内的Raf1和p-ERK的含量降低,提示抑郁发生同ERK信号通路上指标该降低有关,腧穴解郁方干预后能提高抑郁大鼠脑内降低的Raf1、p-ERK的含量,可能激活了ERK信号通路的表达,此可能是腧穴解郁方治疗抑郁症在ERK信号通路方面的发挥机制所在。