黄柏、黄连体内外成分对比研究

作     者：李媛 

作者单位：黑龙江中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孙晖

授予年度：2013年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：黄柏 黄连 成分分析 血清药物化学 UPLC-Q/TOF-MS 

摘      要：目的： 利用超高效液相色谱与四极杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)建立黄柏、黄连系统化学成分分析方法,客观表征黄柏、黄连所含化学成分;并对二者体内外成分进行了比较,旨在为黄柏、黄连质量控制及临床合理用药提供参考。在中药血清药物化学理论及方法指导下,分析并表征大鼠灌胃给予黄柏、黄连后的血中移行成分,为揭示其体内直接作用物质,及黄柏、黄连药效物质基础的深入研究提供基础研究资料。 方法： 应用UPLC-Q/TOF-MS技术分别建立黄柏、黄连体外化学成分和口服给予大鼠后的血中移行成分分析方法,应用串联质谱Q-TOF确定化合物的精确质量,通过相关数据库化学信息检索、色谱保留行为以及MS/MS数据来确认化合物,表征黄柏、黄连的化学成分和血中移行成分。结合多变量模式识别方法主成分分析(PCA)区分黄柏、黄连药材,找出差异性最大的化合物,以反映二者体内外在化学成分的不同。 结果： 1体外化学成分分析 黄柏、黄连色谱图中各峰获得了良好的分离和灵敏的检测,数据的采集在17.5min内被完成。共检测黄柏中色谱峰33个,确认了其中29个,检测黄连中色谱峰32个,确认了其中28个。通过主成分分析确定二者差异性成分26个,共有成分7个,黄柏的特征性标记物13个,黄连的特征性标记物6个。 2血中移行成分分析 通过色谱条件的优化,在24min内完成了含药血清UPLC-Q/TOF-MS色谱图的采集,黄柏、黄连主要血中移行成分获得良好的分离。基于一级、二级质谱数据解析和体外化学成分信息,通过对含药血清、空白血清和体外样品色谱图中各峰的保留时间、质谱数据的直观比较分析,表征了11个黄柏血中移行成分,10个黄连血中移行成分。 结论： 本实验利用UPLC-Q/TOF-MS技术分别对黄柏、黄连体外全成分进行了研究,并结合PCA找出二者共性及差异性成分,为二者鉴别及临床合理应用提供一定基础研究数据。直观比较找出了黄柏、黄连血中移行成分,为阐明黄柏、黄连药效物质基础奠定基础,对进一步研究其有效成分及其体内过程有一定的意义。