PEG-PCL-PEG修饰的羟基积雪草苷温敏性脂质体的制备和烫伤治愈效果评价

作     者：董礁礁 

作者单位：华南理工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘美凤

授予年度：2018年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：羟基积雪草苷 PEG-PCL-PEG(PECE) PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体 二次乳化法 伤口治疗 

摘      要：羟基积雪草苷(Madecassoside,MA)是积雪草中的一种三萜皂苷成分,结构中含有1个三糖链,水溶性强,分子量较大。在临床上广泛应用于治疗手术创伤、烫伤、烧伤等皮肤创伤,具有抑菌、消炎、促进成纤维细胞再生等多种药理作用。但由于它是极性大分子物质,不易透过皮肤表皮到达病变部位,因此其药效及应用在一定程度上受到了限制。脂质体是由一层或多层分散在水中的同心或非同心的脂质分子膜包封而成的球状体。脂质体自身结构与细胞生物膜具有类似性,用于包封羟基积雪草苷时,可提高药物的生物利用度,具有显著的促渗透效果和长效缓释作用。未经修饰的羟基积雪草苷脂质体具有类似液体的流动性,涂抹于烧伤或烫伤的伤口时,加上皮肤所处位置不同而无固定的形态,贴合性很差,很容易造成药物流失,增加敷药次数。针对该问题,本文合成了温敏性材料PEG-PCL-PEG(PECE),在二次乳化法制备羟基积雪草苷脂质体的过程中,将不同质量比的EPC与PECE作为膜材一起溶解于有机相,最终筛选出既具有良好的皮肤贴合性和药物利用度,又能显著促进伤口愈合的PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体。本课题首先对PECE的合成条件进行了优化,并对PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体进行一系列的表征;然后探究了PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体的sol-gel与gel-sol的相态转变温度;最后探究了经PECE修饰前后的羟基积雪草苷脂质体在大鼠二级烫伤实验中的治疗效果。论文具体研究内容如下:1.PECE的合成是可行的。采用开环聚合和偶联反应两步合成得到温敏材料PEG-PCL-PEG(PECE),分别探究了第一步反应温度T、n(?-CL)):n(HMDI))、第二步反应时间t对合成PECE的性质的影响;最佳制备条件下合成的PECE分别采用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振氢谱(H-NMR)、差示扫描量热法(DSC)对其分别进行结构上的表征和温敏性探究。2.PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体粒径适中,稳定性好。在二次乳化法制备羟基积雪草苷脂质体的过程中,将不同质量比的EPC与PECE作为膜材一起溶解于有机相,成功制备得到PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体;首先通过马尔文粒径分析仪将其与未经修饰的羟基积雪草苷脂质体进行粒径、电位等参数上的比较,发现两者没有明显差异;再通过冷场扫描电镜(SEM)和高分辨透射电镜(TEM)对不同质量比EPC/PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体进行表观形貌的表征,从而发现质量比EPC/PECE=1:1的羟基积雪草苷脂质体在扫描电镜下呈球状,且稳定性较好。3.PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体具有适用于皮肤给药的相态转变温度。对不同质量比EPC/PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体进行为期7天的观察,发现只有EPC/PECE为5:4和1:1的羟基积雪草苷脂质体在室温条件下相应放置12h和36h后,出现了从溶胶态到凝胶态的变化;然后由试管倒置法探究得到它们由凝胶态转变为溶胶态的相变温度分别为35°C和43°C。为了避免皮肤涂药时,周围环境温度的变化带来的影响,最后选择EPC/PECE为1:1的羟基积雪草苷脂质体作为大鼠二级烫伤实验的给药样品。4.PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体表现出更好的皮肤贴合性和治愈效果。在体外释放探究中,采用透析法研究了MA-PECE凝胶、羟基积雪草苷脂质体和PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体在48 h内的药物累积释放率,结果发现PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体表现出明显的缓释作用;在大鼠二级烫伤实验中,PECE修饰的羟基积雪草苷脂质体组对伤口的整体愈合效果是最好的,比未经修饰的MA脂质体组表现出更好的皮肤贴合性和治愈效果,尤其是在第12天,其治愈效果显著优于MA脂质体。