水蛭对局灶节段性肾小球硬化大鼠TGF-β1及胶原Ⅳ的影响

作     者：罗文佳 

作者单位：黑龙江省中医药科学院 

学位级别：硕士

导师姓名：王立范

授予年度：2018年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：局灶节段性肾小球硬化 水蛭 胶原Ⅳ 转化生长因子 

摘      要：目的:通过实验研究,观察水蛭对局灶节段性肾小球硬化（FSGS）大鼠血、尿及肾组织Ⅳ型胶原、转化生长因子（TGF-β1）的影响,为水蛭治疗FSGS提供相关的理论依据。方法:采用单侧肾脏切除术,两次尾静脉注射阿霉素,建立阿霉素肾病模型。分为治疗组、模型组、假手术组、空白组四组。动态观察大鼠的一般状态、血清总胆固醇、血浆白蛋白、尿微量白蛋白/尿肌酐变化;将肾脏切片进行HE染色,观察阿霉素肾病大鼠模型组大鼠肾组织的病理改变情况;电镜观察肾脏的超微结构;免疫组化二步法、实时荧光定量法观察Ⅳ型胶原及TGF-β1的表达变化。结果:1.水蛭治疗组能改善阿霉素肾病大鼠一般状态;治疗组大鼠血清总胆固醇、尿微量白蛋白/尿肌酐均低于模型组,血浆白蛋白均高于模型组,差异有统计学意义（P0.05）;2.水蛭治疗组能够减轻FSGS病理损伤;3.免疫组化结果显示:与水蛭治疗组和空白组比较,模型组Ⅳ型胶原在肾小球内皮细胞、系膜细胞和上皮细胞的表达表达增多,差异有统计学意义（P0.05）,与模型组比较,水蛭治疗组Ⅳ型胶原的表达减少,差异有统计学意义（P0.05）;与水蛭治疗组和空白组比较,模型组TGF-β1在肾小球的系膜细胞上的表达表达增强,差异有统计学意义（P0.05）,水蛭治疗组TGF-β1的表达与模型组比较,表达减弱,差异有统计学意义（P0.05）。4.RT-PCR结果显示:与水蛭治疗组和空白组比较,模型组的表达增多,差异有统计学意义（P0.05）,与模型组比较,水蛭治疗组的Ⅳ型胶原表达减少,差异有统计学意义（P0.05）;与水蛭治疗组和空白组比较,模型组TGF-β1mRNA表达增加,差异均有统计学意义（P0.05）,与模型组比较,水蛭治疗组TGF-β1mRNA表达减少,差异有统计学意义（P0.05）。结论:1.水蛭可减少FSGS大鼠尿微量白蛋白的排泄、降低总胆固醇含量,提高血浆白蛋白;2.水蛭可减轻肾脏病理损伤;3.水蛭可能是通过降低TGF-β1和胶原Ⅳ的表达,从而减少了ECM的积聚,延缓FSGS的进展。