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Caveolae参与apelin促血管平滑肌细胞增殖研究

Caveolae参与apelin促血管平滑肌细胞增殖研究

作     者:高晶 

作者单位:南华大学 

学位级别:硕士

导师姓名:陈临溪

授予年度:2009年

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题:apelin-13 APJ caveolae VSMCs增殖 

摘      要:目的:探讨细胞膜特殊凹陷结构caveolae参与G蛋白偶联受体APJ的内源性配体apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMCs)增殖作用,观察caveolae结构的标志蛋白caveolin-1是否与信号蛋白PI3K、ERK1/2形成复合物参与apelin-13促进大鼠VSMCs增殖作用。 方法: 1.组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs;***方法观察VSMCs增殖;*** Blotting方法观察信号蛋白表达;4.免疫共沉淀技术(Co-IP)检测信号分子复合物的形成。 结果: 1. MTT结果显示:caveolae结构破坏剂β-环糊精(β-CD,5mmol/L,25h)可明显增强apelin-13诱导的血管平滑肌细胞增殖(P﹤0.05);2. WB实验结果显示:apelin-13(0,6,8,12,24,48h)刺激VSMCs,caveolin-1表达下调且在6h时作用明显;apelin-13(0,1,2,4,8μM)刺激VSMCs,caveolin-1的表达下调,在1μM时下调明显(P﹤0.05);β-CD(5mmol/L)破坏caveolae后,可使apelin-13下调caveolin-1表达的作用增强(P﹤0.05);3. Co-IP结果显示:对照组(0.1%FBS孵育)及处理组(apelin-13刺激)caveolin-1与PI3K及ERK1/2均有复合物形成,在apelin-13刺激的情况caveolin-1-PI3K复合物减少、caveolin-1-ERK1/2复合物减少,即apelin-13可能促进caveolin-1与PI3K及ERK1/2解离;结论:细胞膜特殊凹陷结构caveolae参与apelin-13促血管平滑肌细胞增殖作用。

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