乳杆菌抗感染及对肠道菌群影响的研究

作     者：任贵强 

作者单位：内蒙古农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张七斤;申之义;关平原

授予年度：2006年

学科分类：090502[农学-动物营养与饲料科学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：乳杆菌 16SrDNA 抗感染 肠道菌群 粘附 

摘      要：本研究通过对乳杆菌***和MG2-1的16SrDNA基因的克隆与序列分析,并对这两株乳杆菌的活菌液、活菌体及其代谢产物进行体外抑菌试验,再用其悬浮液分别饲喂小鼠,攻毒后观察发病情况,攻毒4天后取对照组和喂菌组未死亡的小鼠的肠内容物,用选择性培养基,分离、纯化大肠杆菌和乳酸菌,将分离到的菌株,提取DNA,进行ERIC-PCR扩增,凝胶电泳,最后进行对鸡肠细胞的粘附试验。 结果表明16SrDNA基因序列分析方法与传统的方法鉴定的结果相符合。说明菌株的表型特征、生理生化特性仍是现代乳杆菌分类的重要指标,尤其对大量乳杆菌的分群,按照生化特征来划分仍是可取的。同时运用16SrDNA序列的分析在乳酸杆菌鉴定中的应用是切实可行的。乳酸菌活菌液及其代谢产物都有较强的抑菌活性,而活菌体没有抑菌活性;代谢产物热稳定性较好,能耐受115℃的高温,但抑菌活性受pH值的影响较大,随着pH值的降低抑菌活性逐渐升高,在弱酸和中性条件下失去抑菌活性;代谢产物的抑菌活性受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响不大。在体内抗感染试验中乳杆菌对小鼠起到了保护作用,并且在停止饲喂乳杆菌的第4天,从小鼠肠道内分离到***和MG2-1,说明所饲喂的乳杆菌可以在小鼠肠道内定植,由于乳杆菌对致病菌的拮抗作用使所攻的大肠杆菌数量下降,在饲喂组未分离到O157和K88菌株。乳杆菌***和MG2-1均能够粘附鸡的肠细胞。