银丹心脑通软胶囊在大鼠血浆和脑脊液的成分辨识及药代动力学研究

作     者：原会俊 

作者单位：首都医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：梁日欣

授予年度：2016年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：银丹心脑通 银杏 丹参 液质联用 指纹图谱 血浆 脑组织 脑脊液 药代动力学 

摘      要：1实验目的本文采用健康大鼠作为研究对象,以UPLC-Q-TOF-MS和UPLC-QQQ-MS质谱为分析手段,建立血浆及脑脊液的指纹图谱,分析银丹心脑通吸收入血和进入脑组织的成分;同时探讨银丹心脑通软胶囊吸收入血主要药效成分在体内的代谢及脑组织和脑脊液中的分布规律,明确其药效物质基础,辨识银丹心脑通软胶囊体内的有效成分,为阐明其药理作用机制提供科学依据。以上研究结果如下:2实验方法和结果2.1基于UPLC-Q-TOF-MS手段,银丹心脑通软胶囊血浆和脑脊液指纹图谱研究本实验采用UPLC-Q-TOF-MS,对灌胃银丹心脑通软胶囊后大鼠的血浆和脑脊液样品进行了测定,从血浆样品中共鉴别出18个原型化合物,其中银杏内酯4个,三羧酸类1个,酚酸类5个,二萜醌类4个,皂苷类4个;从脑脊液样品中检测出来7种成分,均来自于血浆中的原型化合物。从血浆和脑脊液中的鉴别出的化合物对其治疗心脑血管疾病的药理作用提供了实验依据。2.2银丹心脑通软胶囊在大鼠血浆中的药代动力学研究根据药代动力学结果显示,9种成分的Tmax分别为:银杏内酯A 0.75 h,银杏内酯B 1.00 h,银杏内酯C 1.50 h,白果内酯0.75 h,槲皮素0.33 h,山奈酚0.50h,异鼠李素0.33 h,丹参酮ⅡA 0.25 h,丹酚酸B 0.75 h;9种成分的Cmax和AUC0-t分别为:银杏内酯A 76.31 ng·m L-1和490.92 ng·m L-1·h-1,银杏内酯B 76.54 ng·m L-1和610.18 ng·m L-1·h-1,银杏内酯C 35.35 ng·m L-1和281.80 ng·m L-1·h-1,白果内酯48.70 ng·m L-1和365.97 ng·m L-1·h-1,槲皮素45.02 ng·m L-1和410.34 ng·m L-1·h-1,异鼠李素27.85 ng·m L-1和319.17 ng·m L-1·h-1,山奈酚49.90 ng·m L-1和401.33ng·m L-1·h-1,丹参酮ⅡA 38.34 ng·m L-1和167.20ng·m L-1·h-1,丹酚酸B 32.00ng·m L-1和118.17 ng·m L-1·h-1;9种成分的T1/2从2.69 h到12.17 h。根据UPLC-MS/MS的实验结果,发现黄酮类成分和丹参酮ⅡA Tmax相对较小,吸收速度快,入血后能迅速达峰;银杏内酯类成分和丹酚酸B吸收相对较慢。9种成分的MRT均大于5h,最高可达17 h,故一日三次能保证使大部分成分达到稳态血药浓度,为其治疗方案的确定提供了实验依据。从9种成分的Cmax以及AUC可以看出,虽然9种有效成分在体内含量均不是很高,但其药理作用的发挥,可能与多种成分的相互作用有关。2.3银丹心脑通软胶囊在大鼠脑组织和脑脊液中分布实验结果显示,在脑组织中没有检测到黄酮类成分,原因可能是其在血浆中与葡萄糖醛酸和硫酸酯键结合后影响其透过血脑屏障。丹酚酸B也未检测出来,因为其为水溶性成分,透过血脑屏障的能力比脂溶性成分差,其提取回收率不高且最低检测限比较高,影响含量的准确测定。脑组织中成分含量较血浆中均有所下降,银杏内酯类成分在1 h时含量最高;丹参酮ⅡA含量相对较低,能很快吸收入脑,在30 min含量最大,且在6小时内均能检测到,提示各成分在脑组织中驻留时间较长。脑脊液中各成分含量远小于脑组织中的,这可能是因为脑组织和脑脊液之间屏障的存在。3结论综上,口服银丹心脑通软胶囊后,在血浆和脑脊液中鉴别出了多种成分,揭示了银丹心脑通软胶囊药效物质可能主要来自银杏和丹参。对银杏和丹参中的9种成分进行药代动力学研究,建立了药时曲线并且研究了其中几种成分在脑组织、脑脊液中的分布情况,得出了9中成分体内药代动力学特征明显,为阐明其在临床上的应用和药理作用提供了科学依据。