EPO通过激活PI3K/Akt途径并上调HSP70的表达对低温下的心衰大鼠起保护作用

作     者：邓琴琴 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王梦洪

授予年度：2010年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：促红细胞生成素 心力衰竭 PI3K/Akt 热休克蛋白70 低温 

摘      要：目的：评价红细胞生成素(erythropoietin, EPO)对低温环境下心衰大鼠的影响并探讨其可能的作用机制。 方法：采用腹腔注射盐酸阿霉素(ADR)建立心衰大鼠模型,随机分为4组:①对照组(A组)8只;②心衰组(B组)20只：采用腹腔注射阿霉素制作大鼠心衰模型;③EPO组(C组)14只：造模后给予腹腔注射EPO,LY294002组(D组)18只：造模后尾静脉注射LY194002,30分钟后腹腔注射EPO后。观察10周后检测超声心动图的改变(?)并测定大鼠血清中SOD、MDA水平,Western blot测大鼠心肌组织中HSP70,Akt、pAkt的水平,RT-PCR测心肌组织中FasmRNA的表达、荧光定量PCR测心肌组织中PI3KmRNA的表达,Tunel法测心肌细胞凋亡。 结果： (1)同对照组相比,阿霉素致心衰大鼠模型LVEDD:增大,EF下降(均p0.01),符合慢性心衰模型的特征;(2)心功能水平：心脏超声显示：和A组相比,B组LVIDd、LVIDs显著扩大,而C组明显低于B组,D组则介于B组和C组之间(P0.01);和A组相比,B组EF、FS值显著下降(p0.01),而C组明显高于B组,D组则介于B组和C组之间。 (3)组织学特征：光镜下可见A组心肌细胞形态、胞质、间质及横(纵)纹均为正常,心衰组则存在心肌细胞横(纵)纹不清,部分区域肌质纤维溶解,胞浆空泡变性,不同程度的炎症细胞浸润和间质水肿病变表现。C组以上病变较B组有明显减轻,心肌细胞横(纵)纹存在;D组则介于心衰组和EPO组之间。 (4)氧化能力：与A组相比,B组SOD活力显著降低(p0.01),MDA含量明显升高(p0.01),而C组SOD活力显著高于B组(P0.01),MDA含量明显低于A组(p0.01), D组则介于B组和C组之间。 (5)蛋白免疫印迹(?)与A组相比,C组和D组大鼠心肌组织中pAkt、hsp70显著增加(p0.01),B组与A组相较无明显变化,四组大鼠心肌组织中Akt的水平无显著差异。 (6)基因表达：与A组相比,B组Fas mRNA的表达明显增加(P0.01),PI3KmRNA的表达下降(p0.01),而C组Fas mRNA的表达较心衰组降低(p0.01),PI3KmRNA的表达较B组明显增加(p0.01),D组结果介于B、C组之间。 (7) TUNEL检测：与A组相比,B组TUNEL染色阳性细胞明显增多(p0.01),C组TUNEL染色阳性细胞则显著低于B组(p0.01), D组则介于B组和C组之间。结论： 1.阿霉素能够诱导血流动力学障碍、恶化心功能,且此作用可能与氧化应激有关。 2.低温会心衰大鼠的心功能进一步恶化并导致心肌细胞凋亡指数增加。PI3K/Akt信号通路是EPO发挥心肌保护作用的通路之一,其作用机制可能是EPO活化PI3K/Akt并上调内源性保护途径HSP70的表达,对低温下的心衰大鼠起心脏保护作用。