SIRT1在硬皮病小鼠胰岛素抵抗中作用的初步探讨

作     者：刘宁宁 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：马云青

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：硬皮病 SIRT1 胰岛素抵抗 白藜芦醇 

摘      要：目的:36.4%的硬皮病患者出现胰岛素抵抗,但机制不明。研究证实沉默信息调节因子1(SIRT1)与胰岛素抵抗密切相关,同时SIRT1也参与SSc的发病过程,SIRT1激活剂白藜芦醇能减轻SSc皮肤和肺纤维化。本实验通过观察硬皮病小鼠胰腺组织中SIRT1、TGF-β1、α-SMA的表达,探讨SIRT1在硬皮病小鼠产生胰岛素抵抗的可能机制。方法:SPF级BALB/C小鼠,6周龄,雌性,随机分为3组:对照组(A组),硬皮病组(B组),白藜芦醇组(C组)。B组和C组连续皮下注射博来霉素构建硬皮病模型,同时C组每天腹腔注射50mg/kg白藜芦醇。四周后,给予2.0g/kg葡萄糖灌胃,在0、30、60、90、120min取尾静脉血测各组小鼠血糖,取内眦静脉血测空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。五周后处死,取小鼠注射部位皮肤,打开腹腔迅速分离胰腺。HE染色观察皮肤的病理变化并测皮肤厚度。羟脯胺酸(HYP)试剂盒测皮肤和胰腺中HYP含量。免疫组化测皮肤和胰腺中SIRT1的水平。Western Blot测胰腺中SIRT1、TGF-β1、α-SMA的蛋白表达量。结果:***染色显示B组皮肤明显增厚,胶原纤维增多,炎症细胞浸润,脂肪组织减少甚至消失,HYP含量明显升高,提示硬皮病造模成功。胰腺组织HYP含量三组间无差异。2.与A组相比,B组和C组出现了糖耐量异常,血糖升高,胰岛素水平升高,HOMA-IR升高;与B组相比,C组HOMA-IR有所下降,差异有统计学意义(P0.05)。3.免疫组化显示与A组相比,B组皮肤和胰腺组织中SIRT1表达下调;与B组相比,C组皮肤和胰腺SIRT1的表达有所升高,差异有统计学意义(P0.05)。*** Blot结果显示与A组相比,B组胰腺中SIRT1表达下调;与B组相比,C组SIRT1的表达有所升高,差异有统计学意义(P0.05)。而胰腺中TGF-β1、α-SMA的表达三组间无显著差异。结论:1.硬皮病小鼠胰腺β细胞中SIRT1的表达下降导致胰岛素抵抗。2.给予白藜芦醇后,SIRT1的表达升高,小鼠胰岛素抵抗程度有所改善。***1可能是硬皮病产生胰岛素抵抗的关键调节因子。