新型水凝胶促进深Ⅱ度烫伤创面再上皮化的研究

作     者：廖昭会 

作者单位：遵义医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：章涛

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：烫伤 创面愈合 再上皮化 水凝胶 

摘      要：目的:探讨局部应用新型水凝胶治疗深Ⅱ度烫伤创面愈合的疗效及其再上皮化的可能机制。方法:将SD大鼠(N=80)随机分为四组:正常对照组(n=20),模型组(造模后不予处理,n=20)、清创胶组(造模后局部应用康惠尔清创胶,n=20)、新型水凝胶组(造模后局部应用新型水凝胶,n=20)。每日用药一次,直至取材前一日;并每24 h观察创面的变化情况,记录最终的创面完全脱痂时间并每隔3日计算各组创面愈合率;治疗后第3、7、14、21 d切取各组创面标本,进行组织HE染色和创面修复的组织病理学评分;Masson染色观察胶原纤维的沉积情况;整合素β1及角蛋白14(K14)免疫组化染色行ESCs的分析;PCNA免疫组化观察细胞增殖情况;荧光定量PCR(q PCR)检测创面组织中KGF、IL-1、IL-6、IL-10、TGF-β、EGF、VEGF、HIF-1α、整合素α3、整合素β1基因的m RNA表达情况。结果:大鼠烫伤模型制备后烫伤部位的皮肤即变为苍白色,略肿胀,皮肤弹性降低。4 h后创面出现点片状瘀血、肿胀,创面湿润。2 d后创面变红、淤血、创面湿润、肿胀,无渗液及化脓;3 d后创面呈棕红色,各组创面结软痂后变硬,创缘有一红圈。脱痂后各创面周围均可见部分新生上皮,中间铺满肉芽组织,创面有少量淡黄色渗出液。模型组第21 d创面未达到完全再上皮化,创面中央有少量肉芽组织生长,无渗液。新型水凝胶组和清创胶组大鼠在第21 d创面基本达到再上皮化。新型水凝胶组的完全脱痂时间快于清创胶及模型组(P0.05)。HE染色显示,在第7、14和21 d新型水凝胶及清创胶的组织病理学评分均高于模型组(P0.05),第21 d新型水凝胶组的组织病理学评分则高于清创胶组(P0.05)。Masson染色可见各组的胶原纤维沉积伴随创面愈合进程逐渐增加。在烫伤后第3 d,模型组的胶原量稀疏,而新型水凝胶组和清创胶组的胶原纤维粗大,排列紊乱。在烫伤后第7 d,新型水凝胶组和清创胶组的胶原纤维量多于模型组(P0.05)。在烫伤后第14 d,模型组的胶原纤维粗大,排列紊乱,而新型水凝胶组和清创胶组的胶原纤维排列趋于整齐,数量均比模型组多(P0.05)。在第21 d,模型组的胶原纤维粗大,排列紊乱;新型水凝胶组和清创胶组的胶原纤维排列整齐,且新型水凝胶组的胶原纤维多于清创胶组和模型组(P0.05),更接近正常组的胶原纤维的量。免疫组化的结果表明,随着创面的愈合,各组的整合素β1、K14的表达量和PCNA阳性细胞率逐渐增加,在第14 d达高峰,且新型水凝胶组的整合素β1、K14的表达量和PCNA的阳性率高于模型组(P0.05);第21 d,新型水凝胶的整合素β1的表达量和PCNA的阳性率下降并低于模型组(P0.05)。q PCR结果表明,与模型组比较,新型水凝胶组和清创胶组的IL-1、IL-6及IL-10的m RNA表达量于造模后14 d均明显降低(P0.05);VEGF、EGF m RNA表达于造模后第3 d即明显升高;TGF-β、HIF-1αm RNA表达量则呈现出先升高、后逐渐降低的趋势;整合素β1的m RNA表达量则于造模后21 d明显增高(P0.05);整合素α3 m RNA表达分别于造模后3 d明显增高(P0.05)。结论:新型水凝胶和清创胶主要通过促进创面上皮化而缩短创面愈合时间,提高愈合质量,但新型水凝胶对深Ⅱ度烫伤创面的完全脱痂时间早于清创胶,在促进毛囊、汗腺等皮肤附属器官修复上新型水凝胶也更胜一筹。新型水凝胶促进烧伤创面再上皮化的作用主要通过提供低氧、潮湿的环境,促进胶原的沉积、减轻创面炎症反应,促进ESCs迁移、增殖,促进烫伤前期EGF、VEGF、TGF-β、HIF-1α、整合素α3的高表达,同时促进烫伤后期整合素β1的高表达机制有关。