小麦抗条锈病基因YrSp的分子标记研究
作者单位:中国农业科学院
学位级别:硕士
导师姓名:牛永春
授予年度:2005年
摘 要:我国小麦条锈病危害普遍而严重,培育和应用抗病品种是防治小麦条锈病最经济、安全、有效的方法。由于条锈病菌的高度变异性以及生产品种中抗条锈基因较为单一,品种抗病性“丧失成为小麦条锈病防治中的突出问题。小麦品种Spaldings Prolific是欧洲小麦条锈菌鉴别寄主,其所具有的抗条锈病基因YrSp具有较好的抗性,可抗当前我国大多数小麦条锈菌生理小种,但在我国小麦育种中还很少应用。因此,开展抗条锈病基因YrSp的分子标记研究,将促进YrSp基因在小麦抗锈育种中的应用,并有助于实现多基因聚合育种,对于逐步实现小麦生产品种抗病基因多样化具有重要意义。 本研究采用AFLP分析方法,以小麦抗条锈病基因YrSp的供体亲本Spaldings Prolific、近等基因系YrSp/6 x Avocet S、轮回亲本Avocet S及由Avocet S和YrSp/6 x Avocet S杂交制备的F代分离群体为材料,开展了小麦抗条锈病基因YrSp的分子标记研究,取得了如下主要结果: 1.采用225对AFLP引物组合,对Spaldings Prolific、YrSp/6 x Avocet S、Avocet S三组材料进行分析,发现12条稳定出现的多态性DNA片段。经用10株感病F代单株和10株抗病F代单株进行遗传连锁性初步检测,确定了分别由4条引物扩增的P34M54、P70M62、P70M62、P32M59、P32M59、P36M53共6条多态性片段与YrSp基因有连锁性。 2.将多态性片段P34M54、P70M62、P70M62、P32M59、P32M59、P36M53分别进行克隆、测序,并根据序列设计特异性引物。将其中的P34M54、P32M59、P36M53成功转化成了SCAR标记,即SC-P34M54、SC-P32M59和SC-P36M53。 3.用208株Avocet S和YrSp/6 x Avocet S杂交制备的F代分离群体,对获得的3个SCAR标记和YrSp的SSR标记Xwmc441之间的遗传关系进行了检验。用MAPMAKER 3.0b软件计算各个标记与目的基因间及各个标记间的遗传距离及相互关系,绘出了4个标记的遗传连锁图,4个标记位于目的基因的一侧,其中SC-P34M54与目的基因相距最近(2.9cM),其余3个标记由近到远依次是SC-P32M59(3.8cM)、SC-P36M53(3.8cM)和Xwmc441(18.6cM)。