北碚榕的种子繁殖及组织培养

作     者：张艳玲 

作者单位：西南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：汤绍虎

授予年度：2015年

学科分类：090706[农学-园林植物与观赏园艺] 0907[农学-林学] 09[农学] 

主      题：北碚榕 种子萌发 育苗技术 组织培养 离体再生 

摘      要：北碚榕(Ficus beipeiensis S.S Chang)隶属桑科榕属。高大乔木,雌雄异株,分布在北碚区北温泉公园内外的石灰岩壁上。北碚榕重庆特有,四季常绿,冠大浓郁,树形优美,园林性状优异,2007年被园林专家评为重庆市十大本土树种之且位居榜首。现有野生植株5株(4雌1雄),其中仅2雌株能正常开花结实,但种子不能萌发(野生植株冠下和周围未曾见到幼苗生长),自然繁殖困难。北碚榕种群数量稀少,生存现状极危,2004年被列入《中国物种红色名录》。迄今,关于北碚榕的繁殖研究,仅有扦插繁殖的报道。但扦插繁殖不仅损伤为数不多的母树,而且繁殖效率较低。本研究以北碚榕种子(实为果实,下同)和野生植株的茎尖为材料,通过种子繁殖和组织培养解决了北碚榕的人工繁殖问题,为其种苗的规模化生产和城市园林应用奠定了基础。主要结果如下：1.北碚榕种子萌发条件以北碚榕(Ficus beipeiensis)种子为材料,研究98%浓硫酸处理(酸蚀)时间(1-20 min)、30℃温水浸种时间(4 h-24 h)、萌发温度(25℃、30℃、35℃)、萌发基质(滤纸、蛭石、河沙、体积比1：1河沙+蛭石)、光照(24 h光照、24 h黑暗、12h光/暗交替)和赤霉素(50～500 mg·L-1)处理对种子萌发的影响。结果表明,北碚榕种子因种皮硬实而具机械休眠作用,经酸蚀处理后可以萌发。种子的适宜萌发条件为：酸蚀3-5 mm后,浸种4-8 h(30℃),以河沙为基质,于(25±2)℃、12 h/d光照(3000 lx)下萌发。在此条件下,15d种子发芽率可达90%以上。北碚榕种子喜光且具浅生理休眠,全光照条件和300～400 mg·L-1 GA3浸种可显著提高发芽率。2.北碚榕种子育苗技术以北碚榕(Ficus beipeiensis)6叶龄实生幼苗为材料,进行穴盆育苗和营养钵育苗。穴盆育苗基质为田土、进口营养土和蛭石,营养钵育苗基质为田土、进口营养土、蛭石+云母石(V：V=1：1)。穴盆育苗和营养钵育苗期间均采用不同养分的叶面施肥(0.5%尿素溶液、Hoagland营养液、自来水),研究不同育苗基质和叶面肥对北碚榕幼苗生长与生理特性的影响。结果表明,在穴盆育苗期间,育苗基质以进口营养土最优,田土次之,蛭石最差;叶面肥以0.5%尿素最好,Hoagland营养液次之,自来水最差。在营养钵育苗期间,育苗基质以进口营养土最优,田土次之,蛭石+云母石最差;叶面施肥以尿素最优、Hoagland营养液次之,自来水最差。3.北碚榕快繁体系的建立以北碚榕(Ficus beipeiensis)野生植株(雌株)的茎尖(长1.5 cm)为外植体,通过丛芽诱导、增殖和生根建立离体繁殖体系。结果表明,茎尖在MS+1.5mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1 NAA培养基中培养30 d,丛芽诱导率达100%,繁殖系数达9.2;不定芽在此培养基中继代培养,1-6代平均繁殖系数达7.0,丛芽长势良好;不定芽在1/2 MS培养基中,30 d生根率达100%,根系发达,试管苗生长健壮。试管苗移栽到土壤营养钵中,30 d成活率达97.14%。幼苗移栽到田间,半年成活率为100%。4.北碚榕离体再生的初步研究以一月生无菌苗叶片、叶柄为外植体,通过脱分化和再分化建立离体再生体系。初步结果表明,叶柄在MS+2 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA培养基中,愈伤组织诱导率达79.17%,愈伤体积较大,褐化较轻,生长较好;叶片在MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 IBA培养基中,愈伤组织诱导率为66.67%,生长较好。在上述培养基中,未见叶片、叶柄外植体直接分化出不定芽。