芸薹根肿菌（Plasmodiophora brassicae）不同接种方法对发病严重度的影响

作     者：叶蕾 

作者单位：四川农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄云

授予年度：2014年

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 

主      题：根肿菌 休眠孢子 接种方法 接种浓度 病情分级标准 

摘      要：芸薹根肿病是一种世界性的土传病害,侵染十字花科植物。该病最早是在地中海西岸和欧洲南部被发现的,在欧洲各国、亚洲的日本以及我国发生已久,近年来曼延尤其迅速,俨然已成为我国十字花科作物上的重要病害之一。本试验对感病寄主和抗病寄主大白菜的根毛受根肿菌侵染情况的影响进行研究;对发生侵染的根毛进行了切片观察,初步了解了根毛侵染阶段病原菌的形态变化;比较了3种不同的病情分级标准对病情指数计算的影响,不同接种浓度和不同接种方法对发病率和病情指数的影响：在寄主的不同生育期接种病原菌,比较其对大白菜幼苗的发病率和病情指数的影响;病原菌接种寄主后不同时期调查发病率和病情指数,探明根肿病接种的适宜方法、接种浓度和接种时间、调查时间。试验结果如下：1.休眠孢子分散剂筛选制备的根肿菌休眠孢子悬浮液久置后易聚集成团,震荡搅拌不易分散,不利于计数以及染色观察。本试验从4种不同的常用分散剂中筛选出分散效果较好的0.1%木质素磺酸钠和0.2%十二烷基苯磺酸钠。综合考虑分散效果和对孢子萌发率的影响,发现0.1%木质素磺酸钠是较为理想的休眠孢子分散剂。2. 根毛侵染根肿病病原菌侵染寄主分为两个阶段：根毛侵染阶段和皮层侵染阶段。感病和抗病寄主受到病原菌侵染都会发生根毛侵染阶段。在显微镜下观察到病原菌侵入根毛后,其形态变化主要分为5个阶段：初生原生质团、未成熟游动孢子囊、成熟的游动孢子囊、游动孢子囊释放次级游动孢子、游动孢子囊变形裂解。3.接种浓度对根毛侵染的影响显微镜下观察寄主根毛侵染,根毛侵染率在接种12d内随着时间的推移而升高,初次观察到根毛侵染是在接菌后的24h。在较低接种浓度的条件下,病原菌几乎不能对寄主植物造成根毛侵染,而接种浓度在1×105～109个·mL-1的范围内根毛侵染率较高。4. 不同接种浓度和方法对发病的影响在不同孢子浓度接种的情况下对寄主的发病情况进行调查,结果表明采用不同的接种方法,最佳的接种浓度不同。菌土法的最佳接种浓度为1×106个·mL-1,灌根法和蘸根法的最佳浓度为1×107个·mL-1。5. 不同病情分级标准对发病情况的影响根据3种常用的病情分级标准计算病情指数,发现不同的分级标准计算得出的病情指数有很大的差异,一般情况下6级标准下的病情指数比4级和9级低,这与分级标准的划分依据有关。以3种不同接种方法接种病原菌,病情指数调查结果为4级标准9级标准6级标准。6. 不同生育期接种与不同时间调查大白菜的不同生育期接种病原菌,寄主发病率和病情指数有较大差异,播种10d内接种,发病率和病情指数较高也较为稳定,是最佳的接种时期。接种后的前10d未观察到有植株发病,接种后30d发病率高达到88.67%,接种50d发病率和病情指数均达到峰值,接种后60d部分白菜幼苗的根部出现腐烂的现象,不利于病情指数的调查和计算。因此苗期调查时间应选在接种后30-50d之间。