家禽VLDLR基因多态性与生长和屠宰性状的相关分析及MDV对VLDLR mRNA表达的影响

作     者：王聪 

作者单位：扬州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张汤杰;宋卫涛

授予年度：2017年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：家禽 VLDLR基因 生长性状 屠宰性状 MDV 表达 

摘      要：极低密度脂蛋白受体(very low density lipoprotein receptor,VLDLR)是低密度脂蛋白受体家族中的一员,主要作用是通过与富含ApoE的脂蛋白结合来调控甘油三酯的代谢。在动物体内,VLDLR主要分布于骨骼肌、脂肪、心脏等组织,在肝脏中分布较少。本实验在前期实验的基础上,对高邮鸭VLDLR基因的多态性进行了进一步的分析,在5’端UTR及信号肽编码区位置检测出4出个新的SNPs位点,同时对VLDLR基因多态性与高邮鸭生长性状和屠宰性状进行了相关分析;在通过RT-PCR的方法对正常鸭和鸡不同组织VLDLR mRNA的表达分布情况进行研究的基础上,对MD鸡不同组织VLDLR mRNA的表达进行检测,以期研究发生肿瘤的禽组织VLDLR mRNA的表达变化情况。1高邮鸭VLDLR基因5’端UTR及信号肽编码区多态性与生长和屠宰性状的关联分析本实验以高邮鸭群体为研究对象,采用PCR扩增、测序法等方法测定了267个样VLDLR基因5’端UTR及信号肽编码区部分序列,在该段序列中检测出4个SNPs(g.151GA、g.170CT、g.206AG、g.278-295+-),基于这4个SNPs位点,采用PHASE2.0软件构建了8种单倍型,其中ACG+为主要单倍型,频率高达29.81%;GTG+和ACA+单倍型频率最低,均为0.96%。另外,在8个单倍型的基础上构建了15种双倍型,其中H4H8频率最高,为28.16%。关联分析结果表明,在第6周龄,双倍型H1H1的体重显著高于H2H8型(P肺脏(11.72±0.28)脂肪组织(4.13±0.05)脾脏(1.76±0.14)肝脏(i.00±0.15);鸡表现为骨骼肌(10.95±0.14)肺脏(3.87±0.23)脂肪组织(3.02士0.11)脾脏(2.31±0.08)肝脏(1.00±0.17)。二者相同,脾脏、肺脏、骨骼肌和脂肪内VLDLRmRNA的表达均极显著高于肝脏(P肝脏(1.00±0.041)肺(0.649±0.027)脂肪(0.168±0.053)脾脏(0.05±0.021),脾脏、肺脏和脂肪组织内VLDLRmRNA的表达量均极显著低于肝脏的表达量(P脂肪(5.13±0.061)肺(2.99±0.178)肝脏(1.00±0.390)脾脏(0.41±0.117),脾脏内 VLDLR mRNA的表达量低于肝脏,且两者差异不显著,肺脏、骨骼肌和脂肪组织内VLDLR表达量均显著高于肝脏(P肺(13.17±0.307)脂肪(2.72±0.050)脾脏(1.17±0.214)肝脏(1.00±0.343),脾脏的表达量略高于肝脏,二者差异不显著,肺脏、骨骼肌和脂肪内VLDLRrmRNA的表达极显著高于肝脏(P0.01),肺脏内VLDLRmRNA的表达高于脂肪,二者差异极显著(P0.01)。结果显示,MDV感染鸡肝脏(发生肿瘤的肝脏)组织中VLDLRmRNA的表达超过了脂肪、肺脏等组织,而攻毒MDV RB1B毒株后未发生MDV感染或被其他疾病感染(如PM)的肝脏内VLDLRmRNA的表达量依然较低。