AEs蛋白在实验性心肌细胞缺氧/复氧损伤中的差异性表达

作     者：廖章萍 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：何明

授予年度：2006年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：阴离子交换蛋白 缺氧复氧损伤 缺氧预适应 延迟保护 心肌细胞 

摘      要：目的：研究AEs蛋白各亚型在实验性心肌细胞A／R损伤中的表达并探讨其作用。 方法：SD新生大鼠(1～3d)，无菌取出乳鼠心脏，经分离、消化与纯化获得心肌细胞;在培养的第4d随机分为4组：正常对照(Control)组、A／R组、缺氧预处理早期相(APC-EP)组及缺氧预处理延迟相(APC-DP)组。分别观察以下指标：①心肌细胞搏动频率;②细胞存活率(MTT法);③培养液中LDH活性;④RT-PCR法检测心肌细胞中AE1、AE2、AE3的mRNA含量;⑤Western Blotting法检测心肌细胞中AE1、AE2、AE3蛋白的表达。 结果：①细胞搏动频率：A／R组(13±3 beats／min)与Control组(95±17beats／min)相比，有显著性差异(p0.01);APC-EP组(91±8 beats／min)、APC-DP组(90±9 beats／min)则无明显改变(p0.05)，与A／R组比较均有显著性差异(均p0.01)。②细胞存活率：A／R(38.3±3.6％)组与Control(90.2±9.3％)组比较，有显著差异(p0.01);APC-EP组(85.1±10.1％)、APC-DP组(84.6±9.8％)分别与A／R组比较，有显著性差异(均p0.01)，APC-EP组、APC-DP组之间无显著性差异(p0.05)。③LDH活性：A／R组(40.36±4.88 IU／L)与Control组(4.16±0.49 IU／L)比较，有显著性差异(p0.01);APC-EP组(13.12±2.06 IU／L)、APC-DP组(11.95±2.81 IU／L)分别与A／R组比较，有显著性差异(p0.01)，APC-EP组、APC-DP组之间无显著性差异(p0.05)。④AEs蛋白各亚型mRNA的表达：Control组、A／R组、APC-EP组、APC-DP组AE1 mRNA表达量分别为0.31±0.06、0.32±0.05、0.93±0.15、1.43±0.12。APC-EP组、APC-DP组较Control组与A／R组AE1 mRNA转录均显著上调(p0.01)，A／R组与Control组无明显差异(p0.05)，DP相的表达量较EP相的更高(p0.05)。Control组、A／R组、APC-EP组、APC-DP组AE2 mRNA表达量分别为0.69±0.16、1.51±0.19、0.79±0.22、0.86±0.20;A／R组与Control组相比，AE2 mRNA转录明显上调(p0.01);APC-EP组、APC-DP组较Control组均无显著差别(p0.05)，且两者之间也无显著性差异