共振光散射双波长比率法在生物药物高分子和分子簇的表征和分析中的应用

作     者：隆异娟 

作者单位：西南师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄承志

授予年度：2005年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：共振光散射技术 双波长比率法 凝聚态 键那绿B 肝素 黄原胶 亚甲基兰 天青A 天青B 水-乙醇 水-甲醇 

摘      要：1993年Pasternack等人首次提出共振光散射(resonance light scattering,RLS)技术,用于生物大分子组装化学以来,共振光散射技术因其实验仪器简单,方法灵敏度高而倍受广大化学研究者关注。在近10年来发展迅速,已成为超分子化学、物理化学和分析化学领域中强有力的分析技术。 本文在本体实验的基础上,提出了RLS双波长比率法。具体内容如下: 1.键那绿B与黄原胶作用的光散射表征及分析应用,主要结果如下: 在pH9.62水溶液中,黄原胶与染料探针键那绿B(Janus green blue,JGB)发生静电作用,产生了以328.5nm为特征峰的共振光散射(RLS)光谱。此波长下,增强的共振光散射强度(ΔI)与一定黄原胶浓度具有线性关系。据此建立了痕量黄原胶的共振光散射分析方法。当键那绿B的浓度为2.2×10mol/L时,测定黄原胶的检测限为12.24ng/ml。 2.提出了RLS比率法,并将此方法应用于一系列阳离子型染料在肝素分子的聚集研究及其分析应用,结合颗粒粒度分析和RLS成像测定了这些染料分子及它们与肝素形成的复合物的颗粒粒度,研究了RLS产生机理。主要内容是: (1) 以肝素(heparin,Hep)与JGB为例,本文通过对生物高聚药物与染料的反应,本文发展了双波长共振光散射比率法(dual-wavelengths resonance lighting scattering ratiometric method)和吸收比率法(absorbance ratiometric method)。在水溶液中,Hep能与JGB相互反应,并在紫外—可见光区产生增强的RLS信号。通过测量285.0nm和345.0nm处的RLS强度比(I)和吸收值比(A),可以在较长的动态范围内对Hep含量进行检测。当JGB浓度固定在1.00×10mol L,