抗牛支原体母源抗体消长规律及高免乳清的制备

作     者：王超丽 

作者单位：石河子大学 

学位级别：硕士

导师姓名：剡根强

授予年度：2014年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：牛支原体疫苗 母源抗体 初乳制剂 消长规律 间接ELISA 

摘      要：牛支原体(Mycoplasma bovis，M. bovis)是引起犊牛传染性肺炎及关节炎的主要致病菌，该病为国内新发奶牛疫病，目前尚无商品化疫苗用于临床。本研究对自主研发的牛支原体灭活氢氧化铝佐剂苗免疫怀孕母牛后的初乳、犊牛血清母源抗体消长时间进行了调查;对免疫初乳乳清制备方法进行了探讨;并对犊牛脐带牛支原体抗体进行了检测，为建立牛支原体灭活疫苗的免疫程序，犊牛灌服初乳的最佳时间和持续时间，抗牛支原体高免初乳的制备提供试验依据。结果如下： 1.采用不同剂量牛支原体灭活氢氧化铝佐剂疫苗免疫怀孕母牛，通过间接ELISA测定初乳乳清中的抗体滴度来确定牛支原体对妊娠母牛最佳的免疫剂量。结果表明：给怀孕母牛免疫剂量为2.5mL/头，间隔2周，免疫两次的免疫效果最佳。用该程序免疫怀孕母牛，初乳乳清中牛支原体IgG的抗体滴度从分娩后呈现逐步下降的趋势，分娩3h含量最高，产后72h时初乳中仍保持较高的抗体滴度。 2.免疫母牛所生犊牛在灌服初乳后，采用间接ELISA测定犊血清中的牛支原体抗体滴度，观察并记录犊牛的健康情况。结果表明：不同剂量的疫苗免疫母牛所产犊牛血清中母源抗体滴度不同，对新生犊牛呼吸道疾病产生保护力也不同，其中以免疫剂量为2.5mL/头，间隔两周，免疫2次的母牛所产的初乳对犊牛的保护力最好。犊牛血清中牛支原体抗体在灌服初乳后的24h最高，此后缓慢下降，第10天时降为0.376，提示犊牛的主动免疫时间应在10日之后进行，以防止对母源抗体的干扰。 3.以母牛产后12h之内的高免初乳，通过检测乳清中蛋白含量及牛支原体IgG滴度作为评价指标，结果表明：初乳经3500r/min，4℃离心30min对初乳的脱脂效果最好;用0.6mol/L的盐酸，pH4.6，室温30min处理，10000r/min离心20min是高免初乳乳清制备的适宜方法。 4.采集免疫和非免疫母牛产犊时的脐带血，通过检测脐带血中牛支原体抗体滴度。结果表明，不同注射剂量疫苗母牛脐带血中牛支原体抗体均为阴性且滴度无差异，免疫组与对照组之间无差异。说明该试验牛群中尚未出现牛支原体子宫内感染。