鞣花酸对人前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响

作     者：郑英俊 

作者单位：南华大学 

学位级别：硕士

导师姓名：彭荣章

授予年度：2007年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：鞣花酸 PC-3 Caspase-3 NF-κB 细胞凋亡 流式细胞仪 

摘      要：目的观察鞣花酸对人前列腺癌PC-3细胞株增殖抑制及诱导凋亡的作用,研究其对Caspase-3和NF-κB的表达的影响,探讨鞣花酸对前列腺癌的作用及其可能机制,为鞣花酸的临床应用提供实验依据。 方法○1体外培养人前列腺癌PC-3细胞后,加入2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的鞣花酸作用于PC-3细胞,并设置阴性对照组(即0μg/ml组),作用12、24和48小时后,MTT法测定各浓度组鞣花酸对PC-3细胞的生长抑制作用。○2应用流式细胞仪检测不同浓度鞣花酸作用48小时后,PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况。○3 HE染色法观察5ug/ml鞣花酸作用48小时后的细胞形态学变化。○4免疫细胞化学检测10ug/ml鞣花酸作用24小时后,实验组与对照组细胞Caspase-3, NF-κB的蛋白表达变化情况。 结果○1 MTT比色法结果显示:各处理组药物均能抑制PC-3细胞生长,鞣花酸对PC-3细胞的抑制作用呈时间和剂量依赖性,与对照组比较均有统计学意义(P0.05),不同浓度鞣花酸处理组之间的两两比较显示也有统计学意义(P0.05);○2流式细胞仪检测结果显示,鞣花酸可将PC-3细胞阻滞于G1/S期并诱导PC-3细胞凋亡,且其阻滞率及凋亡率随着药物浓度的增加而升高。○3 HE染色法结果显示,5ug/ml鞣花酸作用48小时后,出现细胞变圆,皱缩,细胞核固缩,染色质浓集,边聚,核碎裂等细胞凋亡的形态学变化。○4免疫细胞化学结果显示,10ug/ml鞣花酸作用于PC-3细胞24小时后,与对照组相比,实验组Caspase-3蛋白表达明显升高, NF-κB蛋白表达明显降低。 结论○1鞣花酸对人前列腺癌细胞株PC-3的生长具有明显的生长抑制作用,存在剂量和时间依赖关系。○2鞣花酸可诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡并可将前列腺癌细胞阻滞于G1/S期。○3鞣花酸作用于PC-3细胞24小时后,细胞中Caspase-3蛋白表达明显升高,NF-κB(P65)蛋白表达明显下降。○4鞣花酸有可能作为一种抑制增殖、诱导凋亡的抗肿瘤药物应用于肿瘤的化学预防和治疗。