副鸡禽杆菌单因子血清的制备及其致病性的研究

作     者：赵钦 

作者单位：山东农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：姜世金

授予年度：2008年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：副鸡禽杆菌 血清型 单因子血清 致病性 

摘      要：鸡传染性鼻炎(infectious coryza, IC)是由副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum, Apg)引起的一种鸡的急性上呼吸道疾病。该病临床症状主要表现为结膜充血、甩鼻、面部肿胀、眼流泪、厌食和腹泻,其引起的经济损失主要是蛋鸡产蛋率下降(10～40%),育成鸡和肉鸡生长不良以及淘汰率增加。该病于1920年由Beach首先报道,但直到1931年De Blieck才首次分离到了该病的病原体,我国在1962年就有疑似该病例的报道,1987年冯文达首先在北京分离到该菌。目前该病已呈世界性分布,对世界养鸡业造成了巨大的经济损失。 副鸡禽杆菌原名副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum, Hpg),Page等采用平板凝集试验将副鸡禽杆菌分为A、B和C三个血清型,并且三个血清型之间没有交叉保护。A型和C型副鸡禽杆菌均为致病菌株,但同型的不同菌株之间致病力存在差异,而B型副鸡禽杆菌的部分分离菌株没有致病性。目前,对于血清型的鉴定仍然存在着很多问题,例如不同血清型之间的交叉凝集,菌株的自凝以及某些菌株的变异等。 本实验对副鸡禽杆菌的三个代表株Hpg-8(A)、CCM6075(B)和Hpg-668(C)的基本生物学特性进行了研究,包括在鸡肉汤琼脂平板的菌落形态观察,菌体革兰氏染色的形态观察,鸡肉汤培养基中生长规律的摸索,V因子需要试验,血凝试验,动物回归试验和鸡胚接种试验,其结果都符合副鸡禽杆菌的生物学特性。 为了对临床分离菌株进行快速鉴定与血清型分型,本实验利用副鸡禽杆菌的A、B和C三个血清型的代表株Hpg-8、CCM6075和Hpg-668分别制备相应的抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,获得A型、B型和C型三种Apg单因子血清。利用这三种单因子血清对临床上分离到的副鸡禽杆菌进行血清型的鉴定,结果显示6株副鸡禽杆菌的地方分离株的血清型均为A型。 本实验用副鸡禽杆菌三个血清型的代表菌株Hpg-8、CCM6075和Hpg-668分别采用人工眶下窦接种和模拟自然途径两种方法感染30日龄健康鸡,研究副鸡禽杆菌的人工眶下窦接种和模拟自然途径感染两种攻毒模型的致病性差异。整个试验过程,采用数字记录系统对两种攻毒模型感染的鸡出现的临床症状进行记录,并计算平均每日发病计分,绘制动态曲线,然后计算试验期的总平均发病计分。结果表明试验用的Apg三个血清型的菌株,模拟自然途径的攻毒模型比人工眶下窦接种的模型更符合自然感染的发病情况,而且更能精确的反应出菌株的致病性,三株实验菌株中Hpg-8和CCM6075株毒力相差不大,而Hpg-668株毒力相对较弱。