基于GC-MS的样品前处理及血清/血浆对比研究

作     者：蔡品品 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：卢红梅

授予年度：2013年

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 10[医学] 

主      题：代谢组学 气相色谱-质谱联用技术 前处理 血清 血浆 对比研究 

摘      要：采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS),对代谢组学研究中血清样本的前处理方法、血清样本在制备和分析过程中的稳定性以及血清血浆中内源性代谢物的异同进行考察。其中,血清样本的前处理方法主要研究蛋白去除和衍生化两个步骤,血清样本的稳定性主要考察样本在解冻时、氮吹干后及衍生完后的存储温度和时间对代谢物分析的影响。对质控(quality control, QC)样本和血清血浆样本的图谱进行相对峰面积的相对标准偏差(relative standard derivation, RSD)计算,全谱主成分分析(principal components analysis, PCA),信息量计算以及代谢物的定性定量分析。结论如下：(1)数据可靠性分析结果表明,仪器稳定性良好,这些前处理方法重复性及可靠性良好,适用于代谢组学研究。(2)不同前处理方法所得代谢图谱的PCA分析结果和信息量计算结果均表明,不同衍生化试剂对代谢物谱带来的影响大于除蛋白试剂带来的影响。(3)血清样本稳定性实验结果表明,①样本在以下条件下能保持稳定：在4℃或25℃处解冻0.5-24h,氮吹干后在4℃处存放0-48h,或在25℃处存放0-24h,衍生完后不经历冷冻-融解循环在4℃处存放0-48h,或在25℃处存放0-10h;②样本衍生完后,若在进样之前经历了两次冷冻-融解循环,其中代谢物就发生了变化。(4)血清血浆中代谢物对比研究结果表明,血清和血浆中的共有代谢物有38种,除此之外,血浆中还包含另2种代谢物,这些共有代谢物中有11种在血清血浆中含量存在差异。