宫颈癌和胃癌中septin9基因甲基化的研究

作     者：张意琴 

作者单位：宁波大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈辉

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：宫颈癌 胃癌 DNA甲基化 septin9 S-腺苷甲硫氨酸 

摘      要：【目的】 研究宫颈癌和胃癌中septin9启动子甲基化率，并观察分析SAMe对宫颈癌和胃癌中septin9表达的影响，进而探讨septin9启动子甲基化在宫颈癌和胃癌中的意义以及SAMe诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制。 【方法】 首先，采用甲基化特异性高分辨率熔解曲线分析（methylation sensitive highresolution melting curve analysis, MS-HRM）技术检测宫颈癌细胞系HeLa、胃癌细胞系MGC以及13例宫颈癌肿瘤组织中septin9启动子甲基化情况;并分析septin9启动子甲基化与宫颈癌肿瘤组织临床病理进程的相关性。其次，通过DAPI荧光核染色法观察由SAMe处理24h、48h后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC的细胞凋亡情况。最后，通过实时定量逆转录-聚合酶链反应（quantitative reverse transcriptase-polymerase chainreaction, qRT-PCR）方法和MS-HRM技术分别检测由SAMe处理后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9-v1,v5,v mRNA表达水平以及septin9启动子甲基化程度。 【结果】 1.发现宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中存在septin9启动子甲基化。 2.发现38.5%（513）的宫颈癌组织存在septin9启动子甲基化，但其与宫颈癌的临床分期、淋巴结有无转移、有无脉管内癌栓以及患者年龄这些临床病理参数之间的差异均无统计学差异（P﹥0.05）。 3.发现由SAMe处理24、48h后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC出现凋亡。 4.与各自的对照组相比，实验组中宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9-v1,v5,v的mRNA表达水平明显降低。 5.与对照组相比，由SAMe处理后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9启动子甲基化程度基本没有变化。 【结论】 本研究发现宫颈癌和胃癌中存在septin9启动子异常甲基化。虽然SAMe并不能使宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9的甲基化位点发生逆转，但在其作用下septin9-v1表达水平降，并且宫颈癌细胞系和胃癌细胞系发生凋亡。表明SAMe可能通过某种途径作用于septin9，导致septin9-v1mRNA表达水平降低，阻碍了JNK信号途径参与细胞增殖的过程，因而使宫颈癌和胃癌细胞系发生凋亡。