MGMT自身抗体指导胶质母细胞瘤化疗的临床价值探讨

作     者：钱兴龙 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：周幽心

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：多形性胶质母细胞瘤 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶 替莫唑胺 多肽微阵列 自身抗体 

摘      要：目的：06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因编码769bp的全长cDNA序列,含一个621bp的开放性阅读框架,编码207个氨基酸,相对分子质量为22ku,其活性位点在145位的半胱氨酸残基上,可在无条件下催化DNA分子中鸟嘌呤06位上的烷基并将其转移至MGMT第145位的半胱氨酸残基上,使鸟嘌呤损伤修复,DNA的结构和功能得以恢复,同时MGMT在转甲基后将不可逆地失去活性。目前,还没有发现其他蛋白质可参与此过程,正是这种原理使替莫唑胺(Temozolomide TMZ)的化疗失去效果。本研究基于多肽微阵列(polypeptide Microarray)新技术探索多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme GBM)患者血清中耐药基因MGMT自身抗体(AutoAntibody)在化疗中的价值。方法：以28例人脑胶质瘤组织,其中胶质母细胞瘤(GMB)20例,星形细胞瘤8例,以及4例人正常脑组织为研究对象,分别采用多肽微阵列技术检测患者血清中MGMT自身抗体对多肽的响应、甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR MSP)检测组织中MGMT基因启动子区甲基化情况、免疫组织化学(Immunohistochemistry IHC)法检测组织中MGMT蛋白的表达情况。结果：28例胶质瘤标本中,MGMT自身抗体对多肽响应9例,未响应19例,响应率为32.1%;MGMT基因启动子区甲基化10例,去甲基化18例;MGMT蛋白表达阳性14例,阴性14例。4例正常脑组织中MGMT自身抗体对多肽均未响应,启动子区均为去甲基化,蛋白表达均阴性。其中在20例胶质母细胞瘤患者中,MGMT自身抗体对多肽的响应结果与启动子区甲基化状态呈正相关(r=0.579,P0.01);MGMT蛋白表达与启动子区甲基化状态呈负相关(r=-0.533,P0.05)。结论：初步断定正常人血清中可能不存在MGMT自身抗体,而胶质瘤患者血清中MGMT自身抗体对多肽有响应。在20例胶质母细胞瘤患者中,MGMT多肽微阵列及免疫组化检测结果与MSP检测结果存在明显的相关性,多肽微阵列技术检测血清MGMT自身抗体在预测胶质母细胞瘤患者对替莫唑胺耐药性上有一定的作用,通过检测患者外周血清MGMT肽段的自身抗体来判断胶质母细胞瘤患者对替莫唑胺的敏感性,不仅解决了由于无法获取肿瘤组织进行分子和病理学检查而导致的对病人化疗的盲目性,也能够判断患者是否在化疗进程中继发出现了对替莫唑胺的耐药。