接骨木多糖提取工艺优化及其纯化研究

作     者：吴志诚 

作者单位：中国农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：石阶平

授予年度：2005年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 10[医学] 

主      题：接骨木多糖 三氯乙酸 木瓜蛋白酶 纤维素酶 

摘      要：近几年来多糖的研究异军突起,随着香菇多糖的临床应用取得较好功效以及商业化创造巨大利润之后,国内外学者对各种微生物多糖、植物性多糖,尤其是中草药多糖进行了大量的研究,在获得初步进展后也都加快了多糖药物开发的工业化研究。 本次研究主要以接骨木叶为原料首先经正交试验分析了传统水提醇沉的粗多糖得率,得出最佳提取条件,比较了在此最佳条件下碱提、酸提、超声波处理、纤维素酶处理以及超声波酶法处理提取粗多糖的得率。经统计分析得出试验结论:接骨木叶多糖传统水提的最佳工艺参数温度100,时间3h,料水比1/40,经分析比较认为水提—纤维素酶法处理—水提多糖得率最高,接近16%,比传统水提得率提高了37.8%。 脱除蛋白是多糖分离提取中重要的步骤,为了提高接骨木多糖脱蛋白的效率,我们还对接骨木多糖进行了脱蛋白方法的研究,比较了目前几种常用脱蛋白方法的效果,研究了三氯乙酸法脱蛋白的最佳条件和酶法脱蛋白的最佳工艺参数,并比较了最佳参数下各种脱蛋白方法的效果,经统计分析得出结论:在脱蛋白的研究中发现木瓜蛋白酶酶法和三氯乙酸—正丁醇法联用效果最好,只需一次酶法和三次三氯乙酸—正丁醇法就能基本除去蛋白。 最后对接骨木多糖进行了sepahdexG-100柱层析纯化研究,运用凝胶柱层析初步分离出2个组分,一个分子量最大的,一个分子量最小的,组分1含量较多,经纯度鉴定,为单一组分。但经改良后的柱层析纯化条件也并不能将粗多糖良好完全的分级纯化,尚需配合其它手段再进行研究。 本文研究方法规范可靠,所得数据有效。摸索出一套行之有效,适合接骨木多糖分离提取的优质工艺。希望能够对植物多糖构效研究和应用于工业化大量提取开发为中药药物和保健品提供试验依据和理论支持。