不同养殖模式蛋壳表面微生物污染及大肠杆菌生物学特征性研究

作     者：吴颜菲 

作者单位：河北工程大学 

学位级别：硕士

导师姓名：石玉祥;纪爱英

授予年度：2017年

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

主      题：蛋壳 鸡舍空气 细菌污染 大肠杆菌 生物学特性 

摘      要：禽蛋含有很容易被人体吸收的高营养成分,是人们日常食物结构的必需品。但其蛋壳表面易受细菌污染,不仅引起蛋保鲜时间缩短和品质下降,还增加了蛋源人兽共患病发生的几率,蛋壳表面的生物性污染控制受到政府和消费者的高度重视。本文以半封闭式和全封闭式2种养殖模式生产的鸡蛋蛋壳表面细菌和鸡舍气载细菌为研究对象,通过琼脂平板10倍稀释法测定鸡蛋蛋壳表面微生物污染状况;利用常规的细菌分离培养结合16S rDNA序列分析鉴别大肠杆菌种属;同时应用玻板凝集试验、K-B纸片扩散法检测分析大肠杆菌的血清型、耐药性,主要试验结果如下:1、2种养殖模式鸡舍空气及其蛋壳表面细菌污染状况检测蛋壳表面细菌污染与鸡舍气载细菌浓度具有相关性。当鸡舍环境空气细菌污染严重时,鸡蛋蛋壳表面细菌污染也会越明显。与半封闭式蛋鸡养殖模式生产鸡蛋的蛋壳表面细菌污染相比,全封闭式养殖模式生产鸡蛋的蛋壳表面细菌污染相对较轻。2、贮藏时间对不同养殖模式生产鸡蛋的蛋壳表面细菌污染影响鸡蛋贮藏时间的长短对2种养殖模式鸡蛋蛋壳表面细菌变化产生影响。鸡蛋蛋壳表面菌落总数随储藏时间的增长均呈现出上升趋势,但不同养殖模式(封闭式和半封闭式)增长幅度不同,在25±1℃环境条件下存放21d、24d、27d时,半封闭式养殖模式蛋壳表面菌落总数均已超过5×104CFU/g(食品安全国家标准);但21d时全封闭式养殖模式蛋壳表面菌落总数基本符合食品安全国家标准。3、蛋壳表面大肠杆菌的分离鉴定利用常规的细菌分离培养结合16S rDNA序列分析方法,从鸡蛋(半封闭式和全封闭式养殖模式)蛋壳表面共分离15株大肠杆菌。4、蛋壳表面大肠杆菌血清型、耐药性分析2种养殖模式生产鸡蛋的蛋壳表面大肠杆菌优势血清型不同。玻板凝集试验检测结果显示9株大肠杆菌的血清型属于单因子血清型,占总数的60%;6株大肠杆菌为混合血清型,占总菌株数的40%。蛋壳(半封闭式养殖模式)表面大肠杆菌的优势血清型为O101;蛋壳(全封闭式养殖模式)表面大肠杆菌的优势血清型为O65。2种养殖模式生产鸡蛋的蛋壳表面大肠杆菌均呈现出多重耐药性,但全封闭式生产鸡蛋蛋壳表面大肠杆菌耐药程度相对较轻。蛋壳(全封闭式养殖模式)表面大肠杆菌对青霉素、阿莫西林、多西环素有较强的耐药性,耐药率分别为26.67%、33.33%、33.33%;蛋壳(半封闭式养殖模式)表面大肠杆菌对氨苄西林、多西环素、青霉素有较强的耐药性,耐药率分别为53.33%、46.67%、46.67%。优势血清型O101大肠杆菌对青霉素、阿莫西林的耐药性均高达100%,O65大肠杆菌对青霉素耐药性高达95.12%。综上所述,鸡蛋蛋壳表面细菌污染与鸡舍空气气载细菌浓度具有相关性,半封闭式养殖模生产鸡蛋蛋壳细菌污染程度比全封闭式养殖模式相对较重。常温(25±1℃)储藏过程中,半封闭式养殖模式生产鸡蛋蛋壳表面细菌增长幅度明显高于全封闭式养殖模式;2种养殖模式生产鸡蛋的蛋壳表面大肠杆菌均呈现出多重耐药性,但全封闭式生产鸡蛋蛋壳表面大肠杆菌耐药程度相对较轻,优势血清型不同。