水稻OsCIPK10基因的耐逆性功能分析

作     者：刘峰 

作者单位：浙江师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：马伯军

授予年度：2010年

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

主      题：水稻 OsCIPK10 转基因 功能 耐逆性 

摘      要：钙是细胞中非常重要的第二信使,在植物的逆境应答中起着信号传导的作用。类钙调磷酸酶B亚基蛋白（CBL）是一类钙解码器蛋白,它与一类丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶CIPK蛋白能特异性互作,从而在信号转导中发挥生物学功能。研究证明CBL/CIPK信号系统在植物逆境应答中具有重要作用,因此开展水稻CIPK基因的研究,不仅有助于了解植物逆境胁迫下CBL-CIPK信号网络的机制,而且对水稻及其它作物的抗逆性遗传改良也具有重要的指导作用。前期的研究发现,水稻OsCIPK10基因受盐、低钾、ABA、汞、低温和接种白叶枯病菌等处理的诱导表达,表明该基因可能是植物逆境应答途径中的一个上游调控因子。为了研究水稻OsCIPK10基因在逆境胁迫中的功能,本研究构建了OsCIPK10基因的过量表达和RNAi抑制表达载体,以农杆菌介导法转化到了水稻愈伤组织中,经潮霉素筛选和植株再生,一共获得了80个再生的水稻株系。通过PCR检测再生植株基因组中的潮霉素抗性基因（Hpt）,从中筛选到了47个过表达阳性株系,26个RNAi阳性株系。对T,代转基因株系的半定量RT-PCR分析表明,过量表达株系中OsCIPK10基因的表达量显著增加,而部分RNAi株系中OsCIPK10基因的表达受到了一定程度的抑制。对T1代转基因植株中3个过表达和2个RNAi株系在盐、冷和PEG模拟干旱条件下的逆性分析,初步表明过量表达OsCIPK10基因增强了转基因水稻的抗旱性,而抑制OsCIPK10基因的表达可能增强转基因水稻的耐盐性,可见OsCIPK10基因有可能参与了水稻耐盐或耐旱的应答途径,当然这一结果还有待于进一步的实验证明。